产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 噬菌体展示
Ph.D.-12 噬菌体展示肽库试剂盒
#E8110S 10 次淘选实验
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单独出售的组份
Ph.D.-12 Library
#E8111L 50 次淘选实验 ¥22,219
Ph.D.试剂盒组成
– 10 次独立淘选实验的足量噬菌体展示库，109 个克隆
– 28 gIII 测序引物（100 pmol）
– 96 gIII 测序引物（100 pmol）
– E. coli 宿主菌 ER2738
– 对照实验靶分子（链霉亲和素）和洗脱剂（生物素）
– 详细的使用手册
建议测序引物序列（不单独提供）如下：
-28 gIII 测序引物 (22-mer)
5´d(GTATGGGATTTTGCTAAACAAC)3´
-96 glll 测序引物 (20-mer)
5´d(CCCTCATAGTTAGCGTAACG)3´
概述
噬菌体展示是一种体外筛选技术。它可以将一系列多肽或蛋白质文库展示在噬菌体颗粒的外部，而编码这些蛋白的 DNA 则位于病毒颗粒内部。利用展示蛋白与其编码 DNA 之间的联系，我们可以通过一种简单的称为“生物淘选”的体外筛选方法，快速筛选出给定靶分子（抗体、酶、细胞表面受体等）的亲和配体。最简单的淘选方法是（见图 1）：将展示不同多肽的噬菌体文库与固定在平板或小珠上的靶分子孵育，先洗去未结合的噬菌体，而后洗脱特异性结合的噬菌体。扩增洗脱下的噬菌体。重复上述结合扩增过程，使与靶分子结合的多肽序列的噬菌体得到富集。经过 3-4轮筛选后，每个克隆通过 DNA 测序或 ELISA 鉴定。
NEB 提供 3 种随机肽库和供自制肽库所需的 M13KE克隆展示载体。这 3 种肽库包括 7 肽库（Ph.D.-7）、12 肽库（Ph.D.-12）和含有二硫键的环 7 肽库（Ph.D.-C7C）。Ph.D.-C7C 随机肽库所展示的多肽两侧各加了一个半胱氨酸。噬菌体组装时经过氧化，形成环化的多肽。所有肽库的容量超过 20 亿个克隆。上述 3 种肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜蛋白 pIII 的 N 端，故每一个病毒粒子可以表达 5 个拷贝。
展示在噬菌体表面的随机肽库已被应用于多种领域，包括绘制抗原表位图谱（图 2）、研究蛋白质与蛋白质相互作用及酶抑制剂，并且还用于发现 GroEL、HIV、半导体表面、小分子荧光团和药物的肽配基。
