Pictilisib (GDC-0941) 是一种有效的PI3Kα/δ抑制剂，在无细胞试验中IC50为 3 nM，对p110β (11倍)和p110γ (25倍)具有适度的选择性。

靶点

体外研究

GDC-0941也等效作用于PI3Kα和 PI3Kδ和PI3Kα突变型E545-K和H1047-R,也选择性作用于PI3Kβ(10倍)和 PI3Kγ(25倍), 选择性更高地作用于PI3K II, III, 和IV类成员，包括, C2β, Vps34, DNA-PK和mTOR。GDC-0941 作用于U87MG, PC3, 和 MDA-MB-361 细胞，有效抑制Akt磷酸化，IC50分别为46 nM, 37 nM,和 28 nM。GDC-0941抑制U87MG, A2780, PC3, 和MDA-MB-361细胞增殖，IC50分别为 0.95 μM, 0.14 μM, 0.28 μM, 和0.72 μM。GDC-0941处理，有效抑制对Trastuzumab敏感和不敏感的HER2扩增细胞增殖，IC50为149-944 nM,与 Trastuzumab敏感性无关。GDC-0941抑制含PIK3CA突变的HER2扩增的细胞增殖，IC50<500 nM, 且有效抑制抗trastuzumab 的HER2 扩增乳腺癌细胞增殖和活力。GDC-0941 显著抑制HCT116, DLD1和 HT29细胞生长，GI50分别为1081 nM, 1070 nM 和157 nM。

体内研究

在微粒体中，GDC-0941仅有有限的代谢，其口服生物利用度为78%。GDC-0941 每天按 75 mg/kg剂量处理携带人U87MG 恶性胶质移植瘤的雌性NCr无胸腺小鼠，显著抑制生长，肿瘤生长抑制率为 83%。GDC-0941 每天按 150 mg/kg剂量口服处理携带HER2扩增的抗Trastuzumab的MDA-MB-361.1移植瘤 的小鼠，抑制肿瘤生长，且显著延迟肿瘤衰退，与肿瘤中强诱导型凋亡相关。GDC-0941 每天按75 mg/kg剂量处理携带自发性B细胞滤泡性淋巴瘤的PTEN+/-LKB1+/hypo小鼠，持续2周，诱导肿瘤体积下降~40%，伴随着AKT, S6K 和SGK(血清和糖皮质激素蛋白激酶)蛋白激酶的磷酸化被切除。GDC-0941抑制肿瘤细胞增殖，诱导凋亡和抑制中心母细胞数。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9469 mL

9.7344 mL

19.4689 mL

5 mM

0.3894 mL

1.9469 mL

3.8938 mL

10 mM

0.1947 mL

0.9734 mL

1.9469 mL

50 mM

0.0389 mL

0.1947 mL

0.3894 mL

闪烁接近检测:
使用p85α调节亚基，使重组人PI3Kα, PI3Kβ, 和PI3Kδ在 Sf9 杆状病毒系统中共表达，在谷胱甘肽-琼脂糖凝胶上进行亲和层析而纯化GST-融合蛋白。重组人 PI3Kγ表达作为单体 GST融合，也想上述相似方法纯化。GDC-0941 溶于DMSO，加到含200 μg硅酸钇(Ysi) 聚赖氨酸SPA 磁珠, 4 mM MgCl2, 1 mM 二硫苏糖醇 (DTT), 1 μM ATP, 0.125 μCi [γ-33P]-ATP, 和4% (v/v) DMSO的20 mM Tris-HCl (pH 7.5)上，总体积为 50 μL。PI3Kα (5 ng), PI3Kβ(5 ng), PI3Kδ(5 ng), 或PI3Kγ(5 ng)的重组GST-融合 ，加到实验混合物中，开始激酶反应。在室温下温育1小时后, 加入150 μL PBS终止反应。混合物在2000 rpm 转速下离心2分钟，然后使用Wallac Microbeta计数器读数。在 MDL Assay Explorer系统中使用S型，剂量-反应曲线，计算进行至少2次独立重复实验，取平均值，作为IC50值。

细胞实验

• Cell lines: SKBR-3, BT474-M1, AU-565, HCC-1419, ZR75-30, KPL-4, JIMT-1, BT474-EEI, HCC-1954, MCF-7, CALU-3, SKOV-3, 和MKN-7
• Concentrations: 溶于DMSO,终浓度为~10 μM
• Incubation Time: 48,和72小时
• Method:

使用不同浓度 GDC-0941处理细胞48,和 72小时。通过CellTiter-Glo Luminescent细胞活性检测实验测定细胞增殖/活力。通过Western Blot分析pAKT (Ser473), cleaved caspase-3, 和cleaved PARP通过 Caspase-Glo 3/7实验和细胞死亡检测 ELISAplus 实验分别测定caspase 3/7活性, 和凋亡。

动物实验

• Animal Models: 移植MDA-MB-361.1细胞的NCR裸鼠, 皮下移植BT474-M1 细胞的SCID, C.B-17/IcrHsd-Prkdcscid 小鼠
• Formulation: 溶于10% DMSO, 5% Tween-20, 85% 水
• Dosages: ~150 mg/kg/day
• Administration: 口服饲喂

Cobimetinib (GDC-0973, RG7420)是一种有效的高选择性MEK1抑制剂，IC50 为 4.2 nM。其对MEK1的选择性比对MEK2高100倍以上，对其他很多丝氨酸-苏氨酸和酪氨酸激酶没有显著抑制作用。

靶点

体外研究

Cobimetinib对一组广泛类型的肿瘤细胞的生长表现出强烈的抑制活性，特别是对BRAF或KRAS突变型癌细胞系。结合GDC-0941，GDC-0973在888MEL和A2058细胞中导致生存能力降低，通路抑制，以及细胞凋亡增加。GDC-0973和vemurafenib联合给药显著增加所有BRAFV600E系中细胞膜上减少的GLUT-1水平。

体内研究

在负荷BRAFV600E和KRAS突变型肿瘤的小鼠体内，Cobimetinib (10 mg/kg, p.o.)产生抗肿瘤作用，结合GDC-0973和GDC-0941能够提高疗效。在负荷耐药的A375异种移植物小鼠体内，GDC-0973与GDC-0941结合诱导己糖激酶II，c-RAF，Ksr 和p-MEK蛋白质的水平减少。

Binimetinib, ARRY-438162

MB5452

PD184352 (CI-1040)

MB4068

PD318088

MB4064

Pimasertib (AS-703026)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8821 mL

9.4107 mL

18.8214 mL

5 mM

0.3764 mL

1.8821 mL

3.7643 mL

10 mM

0.1882 mL

0.9411 mL

1.8821 mL

50 mM

0.0376 mL

0.1882 mL

0.3764 mL

• Animal Models: 负荷Molm-13，Molm-16，MX-1，DLD-1，HCT-116，LoVo，FaDu，537MEL，A2058，A2058-X1，A375，A375.X1，A427，A549，Calu-6，EBC-1，NCI-H441，NCI-H2122，NCI-H460，NCI-H520.X1，SKOV-3，KP4-X1.1，MiaPaCa-2，22Rv1，DU-145.X1，S，NCI-H69 异种移植瘤的小鼠
• Formulation: —
• Dosages: 10 mg/kg
• Administration: p.o.

Apitolisib (GDC-0980, RG7422)是一种有效的，I型PI3K抑制剂，作用于PI3Kα/β/δ/γ，无细胞试验中IC50分别为5 nM/27 nM/7 nM/14 nM，也是mTOR抑制剂，无细胞试验中Ki为17 nM，比作用于其他PIKK家族激酶选择性高。Phase 2。

靶点

PI3Kα

PI3Kβ

PI3Kδ

PI3Kγ

mTOR

IC50

5 nM

27 nM

7 nM

14 nM

17 nM (Ki)

体外研究

GDC-0980对I类PI3K和mTOR激酶比对其他大多数激酶表现出有效的选择性抑制作用，对mTOR的Ki为17 nM，对PI3Kα，β，δ，和γ的IC50 分别为5 nM，27 nM，7 nM，和14 nM。在体外，GDC-0980显著抑制PC3和MCF7细胞的细胞增殖，IC50分别为307 nM和255 nM。一项最近的研究表明，GDC-0980通过抑制细胞周期进程，并诱导细胞凋亡降低癌细胞活性，在前列腺癌(IC50 < 200 nM 50%，<500 nM 100%)，乳腺癌(IC50 <200 nM 37%，<500 nM 78%) 和NSCLC(IC50 <200 nM 29%，<500 nM 88%)中具有最大效能，在胰腺癌(IC50 <200 nM 13%，<500 nM 67%) 和黑色素瘤细胞系(IC50 <200 nM 0%，<500 nM 33%)中效能较低。

体内研究

在PC-3和MCF-7 neo/HER2异种移植模型中，GDC-0980在1 mg/kg剂量下，通过引起肿瘤生长延迟，表现出显著的抗肿瘤活性。此外，GDC-0980导致肿瘤郁积或退化，最大耐受剂量为7.5 mg/kg。在小鼠体内，1 mg/kg GDC-0980静脉内给药导致低清除率(Clp: 9.2 mL/min/kg，Vss: 1.7 L/kg)。同时，以5 mg/kg的80% PEG400溶液，或50 mg/kg在0.5%甲基纤维素/0.2% Tween-80中以晶体悬浮液口服给药，具有良好的药代动力学参数。

特征

一种有效的，选择性的，口服生物可利用的 PI3Kα，β，δ，γ 和 mTORA 抑制剂。

PI-103

MB3867

PIK-75

MB3869

GSK2126458 (GSK458)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.0056 mL

10.0281 mL

20.0562 mL

5 mM

0.4011 mL

2.0056 mL

4.0112 mL

10 mM

0.2006 mL

1.0028 mL

2.0056 mL

50 mM

–

–

–

酶活性:
I类PI3K亚型的酶活性使用荧光偏振试验测量，其监测产物3,4,5-三磷酸肌醇分子的形成，该产物与荧光标记的PIP3竞争性结合到GRP-1普列克底物蛋白同源域。磷脂酰肌醇酯-3-磷酸产物的增加，使标记的荧光从GRP-1蛋白结合位点被取代，从而导致荧光偏振信号减少。I类PI3K亚型以异二聚体重组蛋白表达并纯化。PI3K亚型在初速率条件下，在10 mM Tris (pH 7.5)，25 μM ATP，9.75 μM PIP2，5% 甘油，4 mM MgCl2，50 mM NaCl，0.05% (v/v) Chaps，1 mM 二硫苏糖醇，2% (v/v) DMSO存在下测定，各种亚型的浓度为: PI3Kα,β 为60 ng/mL；PI3Kγ为8 ng/mL；PI3Kδ 为45 ng/mL。测定在25°C下进行30分钟后，以终浓度为9 mM EDTA，4.5 nM TAMRA-PIP3，和4.2 μg/mL GRP-1检测蛋白质终止反应，然后在Envision酶标仪上读取荧光偏振数据。IC50s通过将剂量反应曲线拟合到4参数方程计算。人重组mTOR(1360−2549)在昆虫细胞中表达并纯化，使用Lanthascreen荧光能量共振转移法测定，其中重组绿色荧光蛋白(GFP)-4-EBP1的磷酸化使用铽标记的抗4-EBP1的磷酸-苏氨酸37/46抗体检测。反应通过ATP起始，在50 mM Hepes (pH 7.5)，0.25 nM mTOR，400 nM GFP-4E-BP1，8 μM ATP，0.01% (v/v) Tween 20，10 mM MnCl2，1 mM EGTA，1 mM 二硫苏糖醇，和1% (v/v) DMSO存在下进行。试验在初始速率于室温下进行30分钟，然后终止反应，在2 nM Tb-抗-p4E-BP1抗体和10 mM EDTA存在下检测产品。将剂量反应曲线拟合到竞争性紧密结合抑制的方程，表观Ki使用测定的6.1 μM ATP的 Km进行计算。

细胞实验：

• Cell lines: PC3 和 MCF7.1
• Concentrations: 0 到 10 μM
• Incubation Time: 72小时或 96小时
• Method: 抗增殖细胞试验使用PC3和MCF7.1人肿瘤细胞系进行。MCF7.1是体内挑选的细胞系，最初衍生自亲本人MCF7乳腺癌细胞系。细胞系在RPMI中于3°C，5% CO2中培养，并用10%胎牛血清，100 units/mL 青霉素，和100 μg/mL 链霉素，10 mM HEPES，和2 mM 谷氨酸盐增补。MCF7.1细胞或PC3细胞分别以1000细胞/孔或3000细胞/孔接种在384孔板的培养基中，培养过夜，再加入GDC-0980，使终DMSO浓度为0.5% v/v。MCF7.1细胞和PC3细胞分别培养3天和4天，然后加入CellTiter-Glo试剂，并使用Analyst酶标仪读取荧光。对于抗增殖试验，细胞生长抑制剂，比如aphidicolin，和细胞毒素剂，比如staurosporine，作为对照。剂量反应曲线拟合为4参数方程，相对的IC50s使用Assay Explorer软件计算。

动物实验：

• Animal Models: PC3 和 MCF7.1 细胞皮下注射到无胸腺 nu/nu(裸)小鼠的右右前肢
• Formulation: GDC-0980在0.5%甲基纤维素与0.2% Tween-80 (MCT)中溶解。
• Dosages: ≤7.5 mg/kg
• Administration: 口服给药

GDC-0994 是一种有效的，可口服的， 具有选择性的 ERK1/2 抑制剂, 其IC50分别为1.1 nM和0.3 nM。 Phase 1。

靶点

体外研究

GDC-0994有效抑制肿瘤细胞中磷酸-p90RSK。

体内研究

GDC-0994(口服)在体外癌症模型中引起显著的多重单剂量活性，包括KRAS突变型和 BRAF突变型人异种移植肿瘤的小鼠。在体内，GDC-0994 (口服)抑制ERK磷酸化和ERK介导的信号转导通路的激活，随后防止ERK依赖性肿瘤细胞增殖和存活。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2735 mL

11.3675 mL

22.7350 mL

5 mM

0.4547 mL

2.2735 mL

4.5470 mL

10 mM

0.2274 mL

1.1368 mL

2.2735 mL

50 mM

0.0455 mL

0.2274 mL

0.4547 mL

Gedatolisib (PF-05212384, PKI-587)是一种高度有效的，双重PI3Kα，PI3Kγ和mTOR抑制剂，无细胞试验中IC50分别为0.4 nM， 5.4 nM和1.6 nM。Phase 2。

靶点

体外研究

PKI-587有效作用于PI3Kα最常突变形式,尤其是H1047R和E545K，IC50分别为0.6 nM 和0.6 nM。与抑制PI3K/mTOR信号通路蛋白磷酸化相一致，PKI-587作用于MDA-361和PC3-MM2 细胞系，抑制肿瘤细胞生长，IC50分别为4 nM和13.1 nM。

体内研究

PKI-587 按 25 mg/kg 剂量静脉注射给药裸鼠，产生低血浆清除力(7(mL/min)/kg),高容量分布(7.2 L/kg),和较长半衰期(14.4 小时)。PKI-587作用于MDA-361移植瘤模型，产生有效的抗肿瘤效果，最低有效剂量(MED) 为 3 mg/kg，最大耐受剂量 (MTD)为30 mg/kg。而 PKI-587 按25 mg/kg剂量作用于H1975(非小细胞肺癌, 突变 EGFR [L858R, T790M])移植瘤模型,持续处理7天，结果90%实验处理组存活。

GDC-0941

MB3891

GSK1059615

MB3881

PIK-90

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.6241 mL

8.1204 mL

16.2409 mL

5 mM

–

–

–

10 mM

–

–

–

50 mM

–

–

–

PI3K 和mTOR 激酶实验:
Enzyme 酶实验在荧光偏振(FP) 格式板上进行，根据 Echelon K-1100 PI3K FP 实验试剂盒法改编。在Sf9细胞中产生人类 PI3Ks和 PI3K-α突变(E545K和 H1047R)。在大肠杆菌中产生GST-GRP1 (小鼠)，然后通过 GST-琼脂糖凝胶分离。实验buffers为反应 buffer [20 mM HEPES (pH 7.1), 2 mM MgCl2, 0.05% CHAPS, 和0.01% β-巯基乙醇] 和终止/检测 buffer[100 mM HEPES (pH 7.5),4 mM EDTA, 0.05% CHAPS]。FP 反应在室温下在室温下进行30分钟，20 μL 反应 buffer含 20 μM磷脂酰肌醇4,5二磷酸（PIP2）, 25 μM ATP, 和<4% DMSO。加入 20 μL 终止/检测 buffer (10 nM 探针和 40 nM GST-GRP)终止FP反应, 2小时后，使用Envision 酶标仪收集数据。使用纯化的 FLAG-TOR (FL 和3.5) 在96孔板上进行常规检测。在激酶实验buffer (10 mM Hepes(pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-甘油磷酸, 10 mM MnCl2, 0.5 mM DTT, 0.25 μM 微囊藻素LR, 和 100 μg/mL BSA)中第一次稀释酶。每孔中，12 μL 稀释的酶与0.5 μL 实验抑制剂或DMSO（对照组）混合。加入含 ATP 和 His6-S6K的12.5 μL 激酶实验buffer 开始激酶反应，反应终体积为 25 μL，含 800 ng/mL FLAG-TOR, 100 μM ATP, 和1.25 μM His6-S6K。实验板在室温下震荡温育2小时，然后加入25 μL 终止 buffer (20 mM Hepes (pH 7.4),20 mM EDTA, 和20 mM EGTA)终止反应。

细胞实验

Cell lines: MDA-361 和 PC3-MM2

• Concentrations: 0 到10 μM
• Incubation Time: 72 小时
• Method: 细胞按每孔3000个接种在96孔培养板上。接种第一天加入PKI-587。PKI-587 处理3天后, 通过测量染料MTS的代谢转换（活细胞）而测定活细胞密度。每次实验时, MTS 和 PMS储液新鲜解冻，然后混合(MTS/PMS, 20:1)。MTS/PMS混合物按每孔20 μL加到96孔板上，然后实验板温育1到2小时。在96孔格式酶标仪上通过在490 nm处测量吸光值而读取MTS实验结果。计算每组PKI-587处理效果。

动物实验

• Animal Models: MDA-361和H1975细胞皮下注射到裸鼠中
• Formulation: PKI-587溶于5% 葡萄糖 [D5/W], 0.3% 乳酸
• Dosages: ≤30 mg/kg
• Administration: 静脉注射处理

MB1112

Gefitinib

MB1112-S

Gefitinib(标准品)

MB2482

O-去吗啉丙基吉非替尼

Gemcitabine是核酸合成抑制剂，是有效、特异的脱氧胞苷类似物，用于化疗。

体外研究

在CCRF-CEM人白血病细胞培养物中，Gemcitabine抑制50％的细胞生长，IC50为1 纳克/毫升。Gemcitabine和deoxycytidine联用使生物活性降低1000倍。在人胰腺癌L3.6pl细胞中，Gemcitabine和C225联用产生额外的细胞毒作用，并随Gemcitabine浓度增多而增强。在野生型A2780和耐顺铂ADDP细胞中，Gemcitabine和Cisplatin联用产生协同效应。

体内研究

在胰腺L3.6pl肿瘤转移的裸鼠中，Gemcitabine和C225联用导致生长抑制，肿瘤消退。Gemcitabine单独给药治疗减少了平均肿瘤体积，从538到152毫米。在Gemcitabine治疗的肿瘤中，Gemcitabine可以减少血管内皮生长因子和白细胞介素8的产生。Gemcitabine是能够显著地和特异地减少骨髓抑制性细胞的数量，并不显著改变CD4（+）T细胞，CD8（+）T细胞，NK细胞，巨噬细胞，或B细胞的数量。Gemcitabine和curcumin联用显著减少肿瘤体积（与对照组和单独Gemcitabine处理相比），Ki-67的增殖指数（与对照组相比），NF-κB的激活和表达NF-κB的调节基因产物（细胞周期蛋白D1，c-myc的和Bcl-2和Bcl-xL的细胞凋亡蛋白-1，环氧化酶-2，基质金属蛋白酶，和血管内皮生长因子的细胞抑制剂）。Gemcitabine和curcumin联用也抑制血管生成，以CD31（+）的微血管密度为标志。

Gemcitabine HCl

MB1113-S

Gemcitabine HCl（标准品）

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.7994 mL

18.9970 mL

37.9939 mL

5 mM

0.7599 mL

3.7994 mL

7.5988 mL

10 mM

0.3799 mL

1.8997 mL

3.7994 mL

50 mM

0.0760 mL

0.3799 mL

0.7599 mL

• 将吉西他滨溶解在DMSO中并储存，然后在使用前用适当的培养基稀释。
• 将细胞（人胰腺细胞系，Mia PaCa-2，BxPC-3，AsPC-1，PANC-1，PL-45和正常胰腺导管上皮细胞，hTERT-HPNE细胞）接种到96孔板中（3000 细胞/孔）一式三份。 孵育过夜后，更换培养基并用I3C和/或NBMPR处理细胞24小时。 再次更换培养基，在存在或不存在相同浓度的I3C和/或NBMPR的情况下，在含有不同浓度的吉西他滨的培养基中培养细胞48小时。 然后按照制造商的说明对细胞进行CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay（MTS）。 在加入20μLMTS试剂/孔后2小时测量490nm处的吸光度。

动物实验

• 吉西他滨在羟丙基甲基纤维素，0.2％吐温80（HPMT）（小鼠）中制备。
• 吉西他滨在0.9％盐水（大鼠）中制备。
• 老鼠
• 1个月大，LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H;将Pdx-1-Cre小鼠随机分入治疗组（安慰剂，DMAPT，吉西他滨，DMAPT /吉西他滨）。安慰剂（载体=羟丙基甲基纤维素，0.2％吐温80 [HPMT]）和DMAPT（HPMT中40mg / kg体重）通过每天一次口服洗胃给药。每周两次通过腹膜内注射施用吉西他滨（PBS中50mg / kg体重）。每周监测小鼠体重。继续治疗直至小鼠出现嗜睡，腹胀或体重减轻的迹象，此时将其处死。通过检测单个LoxP位点的存在，在小鼠胰腺中确认成功的切除 – 重组事件。
• 大鼠
• 该研究在80只雌性Wistar大鼠中进行，初始重量约为250g。通过耳标识别动物并如下分组。将40只大鼠分成5组，每组8只：4组，分别以剂量分别为2,4,6和8 mg / kg的气管内喷雾剂给予吉西他滨肺部给药（LD2，LD4，LD6，LD8组），一组接受0.9％盐水载体溶液（组LDv）的喷雾给药。将剩余的40只大鼠分成5组，每组8只：四组分别通过管饲法分别以2,4,6和8mg / kg的剂量口服递送吉西他滨（OD2，OD4，OD6，OD8组），组通过管饲法接受相同体积的0.9％盐水（组ODv）。该协议包括以1周间隔隔开的九个会话。在会话期间，将动物保持在标准实验室条件下，并且在每个笼子中由四只动物的一组饲养，其中有垫料并且可以自由获得颗粒食物和自来水。将笼子放置在与抽吸系统连接的封闭腔室中。

Gemcitabine HCl是一种DNA synthesis抑制剂，作用于PANC1，MIAPaCa2，BxPC3和Capan2细胞，IC50分别为50 nM， 40 nM， 18 nM和12 nM。

靶点

体外研究

Gemcitabine作用于BxPC-3, PANC-1, 和MIA PaCa-2细胞，诱导NF-κB活性，作用于BxPC-3 和PANC-1细胞，降低NF-κB抑制剂 IκBα水平。低剂量Gemcitabine处理BxPC-3细胞48小时提高NF-κB 结合，这种作用存在剂量依赖性。相反, 更高剂量Gemcitabine处理BxPC-3细胞48小时，降低 NF-κB DNA 结合，而更高剂量Gemcitabine处理BxPC-3细胞24小时，提高NF-κB结合

体内研究

与PBS处理的小鼠相比，Gemcitabine处理的小鼠瘤内NF-κB 活性显著提高(提高1.3- 到1.8-倍),说明 Gemcitabine也诱导NF-κB 活性。

• Cell lines: BxPC-3, MIA PaCa-2, 和 PANC-1 细胞
• Concentrations: 0.2 μM
• Incubation Time: 24 小时或48小时
• Method: BxPC-3, MIA PaCa-2, 和PANC-1 细胞接种在96孔板中。24小时后,使用 DMAPT 和/或 Gemcitabine处理24小时或48小时。使用细胞死亡检测 ELISA测定细胞质组蛋白相关 DNA片段的量，而量化细胞凋亡。

动物实验：

• Animal Models: 携带MIA PaCa-2细胞的无胸腺裸鼠
• Formulation: PBS
• Dosages: 50 mg/kg或100 mg/kg
• Administration: 腹腔注射

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.3371 mL

16.6856 mL

33.3712 mL

5 mM

0.6674 mL

3.3371 mL

6.6742 mL

10 mM

0.3337 mL

1.6686 mL

3.3371 mL

50 mM

0.0667 mL

0.3337 mL

0.6674 mL

593.66

化学式

C27H33N3O3S.C2HF3O2

CAS号

1217457-86-7

稳定性

3 years -20°C powder

2 years -80°C in solvent

100 mg/mL (168.44 mM)

Ethanol

100 mg/mL (168.44 mM)

Water

<1 mg/mL 难溶或者不溶

GGTI 298是牛儿基转移酶I（geranylgeranyltransferase I）抑制剂，能够将人类肿瘤细胞细胞周期阻止在G1期并诱导凋亡。

靶点

体外研究

GGTI-298将人类肿瘤细胞的细胞周期阻滞在G1期，并诱导凋亡。对人类肺癌细胞Clau-1处理以GGTI-298抑制成视网膜细胞瘤蛋白的磷酸化，成视网膜细胞瘤蛋白的磷酸化是G1向S期转变的关键步骤。两个G1/S周期蛋白依赖性激酶CDK2和CDK4，其活性在受到GGTI-298处理后被抑制（Calu-1细胞）。GGTI-298对CDK2、CDK4、CDK6以及细胞周期蛋白D1和E的表达水平影响不大，但是会降低细胞周期蛋白A的水平。GGTI-298提高抑制蛋白p21和p15的表达水平，而对p27和p16影响不大。GGTI-298促进p21、p27与CDK2的结合，而减少它们与CDK6的结合。它还能促进p15与CDK4的结合，减少其与p27的结合。对纤维母细胞预处理GGTI-298，将阻止PDGF-和EGF-依赖性的酪氨酸激酶受体的酪氨酸磷酸化。GGTI-298对纤维母细胞、上皮细胞、平滑肌细胞具有抗增殖作用，其可能是通过G1期阻滞而介导这种生长抑制作用。

体内研究

GGTI-298在裸鼠中抑制肿瘤的生长。

Gilteritinib(ASP2215)是小分子FLT3/AXL抑制剂，对FLT3和AXL的IC50值为0.29 nM和0.73 nM。其抑制c-KIT的IC50值约为抑制FLT3的800倍。

IC50 & Target

体外

在表达突变型FLT3的MV4-11和MOLM-13、Ba/F3细胞中，Gilteritinib对FLT3-ITD（内部串联重复）和FLT3-D835Y具有有效的抑制活性。Gilteritinib在细胞实验和动物模型中，可降低FLT3及其下游靶点的磷酸化水平。在所检测的78种激酶中，浓度为1 nM或5 nM的Gilteritinib可抑制其中8种激酶活性（即抑制程度超过50%）。对MV4-11细胞进行Gilteritinib处理，处理48小时可诱导细胞凋亡。Gilteritinib处理24小时后还能下调抗凋亡蛋白如MCL-1、BCL2L10、survivin的表达。

体内

在体内实验中，gilteritinib经口服后可在异种移植瘤组织中高水平地分布。在FLT3-driven的AML模型中，gilteritinib在肿瘤组织中的富集使FLT3活性降低、肿瘤消退并改善生存。gilteritinib的抗肿瘤活性与它对磷酸化FLT3和磷酸化STAT5的双重抑制相关。此外，在小鼠IBMT模型中，gilteritinib可降低白血病负担并延长生存时间。在小鼠模型中gilteritinib的处理没有明显毒性作用。

细胞实验

• Cell lines: MV4-11细胞
• Concentrations: 0.1 nM, 1 nM, 10 nM
• Incubation Time: 2 h
• Method:

用DMSO或不同浓度的gilteritinib处理MV4-11细胞2小时，然后通过免疫沉淀和免疫印迹检测细胞中磷酸化FLT3和总FLT3的含量。 
(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: MV4–11 xenografted mice (Nude mice)
Formulation: 0.5% methylcellulose solution
Dosages: 1 mg/kg, 6 mg/kg, and 10 mg/kg
Administration: oral
(Only for Reference)

Quizartinib (AC220)

MB4635

G-749

MB4636

AMG925

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8093 mL

9.0463 mL

18.0927 mL

5 mM

0.3619 mL

1.8093 mL

3.6185 mL

10 mM

0.1809 mL

0.9046 mL

1.8093 mL

50 mM

0.0362 mL

0.1809 mL

0.3619 mL