GSK1292263是一种新型GPR119激动剂，用于治疗2型糖尿病。

靶点

GPR119

体外研究

GSK-1292263通过使用Hypo1从1538种化合物中被选出，与Hypo1中一致的GSK-1292263的拟合值和估计值分别为8.8和7.7 (nM)。

体内研究

在雄性Sprague-Dawley大鼠体内，GSK-1292263(3-30 mg/kg)以单剂量给药在营养素不存在时，与循环胃肠肽，包括胰高血糖素样多肽1(GLP-1)，肠抑胃肽(GIP)，多肽YY (PYY)和胰高血糖素的增加水平相关，在口服葡萄糖耐量测试(OGTT)中，葡萄糖给药会加强循环胃肠肽的增加。在大鼠静脉内葡萄糖耐量测试中，GSK-129226显著增加胰岛素反应的峰值，并且与载体对照组相比，增加30-60%的胰岛素AUC(0-15 min)，此处胰岛素的上调与葡萄糖清除率的显著增加相关。在Zucker糖尿病肥胖大鼠的6周研究中，与空白对照大鼠样本中胰岛素免疫反应性相比，GSK-1292263与胰腺切片中胰岛素免疫反应性在统计学上的显著增加相关。Sprague-Dawley大鼠体内，高胰岛素-正常血糖钳夹实验中，胰岛素注射2小时前，GSK-1292263以10 或30 mg/kg的剂量给药或与载体对照相比，刺激胰高血糖素分泌，而不增加血糖水平。

APD-597

MB2420

APD668

MB2419

AS1269574

MB2413

MBX-2982

MB2415

PSN375963

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.1903 mL

10.9515 mL

21.9029 mL

5 mM

0.4381 mL

2.1903 mL

4.3806 mL

10 mM

0.2190 mL

1.0951 mL

2.1903 mL

50 mM

0.0438 mL

0.2190 mL

0.4381 mL

GSK1838705A 是有效的IGF-1R抑制剂，IC50为2.0 nM, 适度有效作用于IR和ALK，IC50分别为1.6 nM 和 0.5 nM,对其他蛋白激酶几乎没有作用活性。

靶点

IGF-1R (Cell-free assay)

IR (Cell-free assay)

ALK (Cell-free assay)

IC50

2 nM

1.6 nM

0.5 nM

体外研究

GSK1838705A有效且ATP竞争性抑制IGF-1R和IR，appKi值分别为0.7 nM和1.1 nM。在细胞中，GSK1838705A有效抑制配体诱导的IGF-1R和IR磷酸化，IC50 分别为85 nM 和79 nM。GSK1838705A对一系列衍生自固体和血液肿瘤的细胞系，比如L-82，SUP-M2，SK-ES 和MCF-7细胞表现出显著的抗增殖作用，EC50 分别为24 nM，28 nM，141 nM 和203 nM。GSK1838705A使MCF-7 和NCl-H929细胞主要积累在细胞周期的G1 (2N)期。GSK1838705A也会抑制ALK，Ki为0.35 nM，抑制核仁磷酸蛋白(NPM)-ALK融合细胞的增殖，EC50为24-88 nM。GSK1838705A有效抑制Karpas-299 和SR-786细胞中NPM-ALK磷酸化，而对STAT3磷酸化仅有适度的作用。

体内研究

I在负荷NIH-3T3/LISN肿瘤的小鼠体内，GSK1838705A (60 mg/kg)口服治疗抑制77%肿瘤生长，而没有显著的体重损失。在负荷COLO 205肿瘤的小鼠体内，GSK1838705A (30 mg/kg)能够抑制80%的肿瘤生长。此外，GSK1838705A的抗肿瘤作用在负荷HT29异种移植物或BxPC3异种移植物的小鼠体内也能观察到。在小鼠体内，GSK1838705A (60 mg/kg)通过抑制IR信号，引起血糖水平短暂增加2倍。GSK1838705A (60 mg/kg)抑制已建立的Karpas-299异种移植物的生长，抑制率为93%，而对大鼠的体重没有影响。

特征

一种 IGF-1R 和胰岛素受体的小分子抑制剂。

NVP-AEW541

MB3955

OSI-906 (Linsitinib)

MB3909

PQ401

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8777 mL

9.3884 mL

18.7769 mL

5 mM

0.3755 mL

1.8777 mL

3.7554 mL

10 mM

0.1878 mL

0.9388 mL

1.8777 mL

50 mM

0.0376 mL

0.1878 mL

0.3755 mL

激酶试验:
IGF-1R (氨基酸957-1367)和IR (氨基酸979-1382)的胞内域，通过杆状病毒表达的谷胱甘肽S-转移酶标记的蛋白质编码，用于均相时间分辨荧光试验测定IC50s。过滤结合试验用于appKi测定，使用活化的IGF-1R和IR激酶进行。扩展的GSK1838705A的激酶选择性试验通过筛选KinaseProfiler组中的化合物进行。

细胞实验：

• Cell lines: L-82，SUP-M2，SK-ES 和 MCF-7
• Concentrations: 0 到 10 μM
• Incubation Time: 72小时
• Method: 将细胞接种在96孔板，在37 °C下培养过夜，用DMSO 或GSK1838705A处理72小时。对于NIH-3T3/LISN增殖试验，将细胞接种在胶原包被的96孔组织培养板，使其附着24小时。培养基用无血清培养基替换，细胞用GSK1838705A处理2小时。加入IGF-I (30 ng/mL)后，细胞培养72小时。细胞增殖使用CellTiter-Glo发光细胞活力检测定量。IC50s使用四参数曲线拟合软件包(XLfit4)根据细胞毒性曲线确定。

动物实验：

• Animal Models: L-82，SUP-M2，SK-ES 和 MCF-7 细胞皮下注射到 CD1 或 SCID 小鼠的右侧。
• Formulation: GSK1838705A溶于20% 磺丁基β-环糊精(ISP; pH 3.5)
• Dosages: ≤60 mg/kg
• Administration: 口服给药

产品描述

GSK1904529A 是选择性的IGF-1R和IR抑制剂，IC50分别为27 nM和25 nM,作用于IGF-1R/InsR比作用于Akt1/2/, Aurora A/B,B-Raf, CDK2, EGFR等选择性高100倍以上。

靶点

IGF-IR

IR

IC50

27 nM

25 nM

体外研究

GSK1904529A 是选择性抑制剂，作用于IGF-IR和IR时IC50分别为27和25 nM。GSK1904529A是可逆的ATP竞争性抑制剂。GSK1904529A 作用于IGF-IR和IR时Ki值分别为1.3和1.6 nM。GSK1904529A浓度大于0.01 μM时有效抑制IGF-IR和IR磷酸化作用，随后阻断下游信号。细胞增殖实验显示GSK1904529A有效抑制NIH-3T3/LISN, TC-71, SK-N-MC, SK-ES，和RD-ES细胞，IC50分别为60, 35, 43, 61，和62 nM。GSK1904529A也抑制其他多发性骨髓瘤和尤文氏肉瘤细胞系，包括NCI-H929, MOLP-8, LP-1，及KMS-12-BM等等。

体内研究

携带NIH-3T3/LISN肿瘤的鼠，按体重，每千克口服处理30mg GSK1904529A，每天2次，结果显示肿瘤抑制率达98%；而GSK1904529A作用于携带COLO 205移植瘤的鼠，每天处理1次，结果显示肿瘤抑制率达75%。GSK1904529A 可用于治疗多种IGF-IR依赖性肿瘤，包括前列腺癌，结肠癌，乳腺癌，胰脏癌，卵巢癌,和肉瘤。

溶解性

DMSO 124 mg/mL，水 <1 mg/mL，乙醇 <1 mg/mL

稳定性

2年 -20°C粉状，6月-80°C溶于DMSO

特征

GSK2126458 是高选择性的，有效p110α/β/γ/δ, mTORC1/2抑制剂，Ki分别为0.019 nM/0.13 nM/0.024 nM/0.06 nM 和 0.18 nM/0.3 nM。Phase 1。

靶点

p110α
(Cell-free assay)

p110δ 
(Cell-free assay)

p110γ 
(Cell-free assay)

p110β
(Cell-free assay)

mTORC1 
(Cell-free assay)

IC50

0.019 nM(Ki)

0.024 nM(Ki)

0.06 nM(Ki)

0.13 nM(Ki)

0.18 nM(Ki)

体外研究

GSK2126458有效抑制人类癌细胞中发现的p110α(E542K, E545K, 和H1047R)常见激活突变型，Ki 分别为 8 pM, 8 pM 和 9 pM。GSK2126458作用于T47D和BT474 细胞，显著降低pAKT-S473水平，IC50分别为 0.41 nM 和0.18 nM。 而且, GSK2126458作用于多种细胞系，包括T47D 和 BT474乳腺癌细胞系，导致细胞周期停在G1期，且抑制细胞增殖，IC50分别为3 nM 和2.4 nM。

体内研究

GSK2126458作用于BT474人类移植瘤模型，降低pAKT-S473水平，这种作用存在剂量依赖性，按300 μg /kg低剂量处理抑制肿瘤生长，这种作用存在剂量依赖性。此外, GSK2126458 作用于四种临床前期物种(小鼠, 大鼠,犬 ,和猴 )，具有低血液清除力和良好口服生物有效性。

PI-103

MB3867

PIK-75

MB3888

BGT226 (NVP-BGT226)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9782 mL

9.8912 mL

19.7824 mL

5 mM

0.3956 mL

1.9782 mL

3.9565 mL

10 mM

0.1978 mL

0.9891 mL

1.9782 mL

50 mM

0.0396 mL

0.1978 mL

0.3956 mL

体外均相时间分辨荧光技术（HTRF）测定 PI3K 抑制:
在384孔聚丙烯母板上，化合物 (3倍溶于100% DMSO) 从1列到12列，和13列到24列连续稀释，获得11种浓度 GSK2126458。6列和18列只含DMSO。滴定后，0.05μL 立即转移到384孔低容量实验板上。 实验板中含3种药物对照(PI3K 抑制剂)和3组实验对照: (1) 不含抑制剂的酶实验;(2) 去酶buffer, 和 (3)去酶加 PIP3的buffer。DMSO加到6列和18列的所有孔中。40 μM PIP3加到 1X 反应 buffer (1μL 200 μM PIP3)中， 交替 18列的行数 ( B, D, F, H, J, L, N, P)。不含酶的对照实验在 A, C, E, G, I, K, M, O孔中 (0.1μL 100% DMSO)中进行。使用 HTRF试剂盒优化PI3K 实验 。实验试剂盒中含7种试剂: 1) 4X 反应Buffer; 2) PIP2 (底物); 3) Stop A (EDTA); 4) Stop B (生物素-PIP3); 5) 检测混合物A (链霉亲和素-APC); 6)检测混合物 B (Eu-标记的抗-GST抗体和 GST标记的 PH域); 7) 检测混合物 C (KF)。通过使用去离子水按1:4稀释而制备PI3K反应 Buffer。加入新鲜制备的 DTT，终浓度为5 mM。加入酶，使用Multidrop Combi 在1X反应 buffer中加入2.5μL PI3K，加到每孔中 ，开始预温育化合物。实验板在室温下温育15分钟。 使用Multidrop Combi，加入 2.5μL 2X底物溶液(PIP2和 ATP，溶于 1X 反应buffer)开始反应。实验板在室温下温育1小时。 使用Multidrop Combi在所有孔中加入2.5μL 终止液 (Stop A和 Stop B按5:1比例预混合)，反应淬灭。使用Mulitdrop Combi(检测混合物 C, 检测混合物 A,和检测混合物 B 按18:1:1比率混合，即: 6000 μL 总体积, 混合 5400 μL 检测混合物 C, 300μL 检测混合物 A, 和 300 μL 检测混合物 B)在所有孔中加入2.5μL 检测液，进行淬火反应，检测形成的产品。备注:这种溶液在使用前2小时制备。在暗中温育1小时后，在Envision 酶标仪上测量HTRF信号，在330nm 处测定激发光，在620nm (Eu) 和665nm (APC)处双重发射光。

细胞实验：

• Cell lines: BT474, HCC1954 和 T-47D
• Concentrations: 0 到 1 μM
• Incubation Time: 72 小时
• Method: BT474, HCC1954 和 T-47D(人类乳腺)培养在含10%胎牛血清的 RPMI-1640 培养基中，培养在37oC下含 5% CO2的 孵育器中。在实验前2到3天，细胞按密度分到T75 烧瓶中，这样在实验收集时获得约70-80% 细胞汇合。使用0.25% 胰蛋白酶-EDTA收集细胞。在细胞悬液中使用台酚蓝染色排除染色，进行细胞计数。细胞按每孔1000个细胞接种在384孔黑色平底聚苯乙烯板中， 每孔含48 μL 培养基。所有实验板置于5% CO2, 37oC 下过夜，第二天加入 GSK2126458。使用CellTiter-Glo处理一个实验板，用于第一天测量。GSK2126458 在清澈见底的聚丙烯384孔板中制备，连续稀释两倍。4 μL 这些稀释液加到105 μL 培养基中混合溶液后, 细胞板的每孔中加入2 μL这些稀释液。所有孔中的 DMSO 终浓度为0.15%。细胞在37oC, 5% CO2 环境中温育 72小时。随后与 GSK2126458温育72小时。CellTiter-Glo试剂加到实验板中，使用与孔中细胞培养体积相当量的体积。震荡实验板约2分钟，在室温下温育约30分钟，然后在Analyst GT 读数器上读取化学分光信号。

动物实验：

• Animal Models: 在小鼠体内移植BT474肿瘤
• Formulation: GSK2126458 溶于DMSO，然后在水中稀释
• Dosages: ≤300 μg /kg
• Administration: 口服处理

GSK2193874是一种具有口服活性的、有效的、选择性transient receptor potential vanilloid 4 (TRPV4)阻滞剂，对hTRPV4和rTRPV4的IC50分别为0.04和0.002 μM。

靶点

体外研究

GSK2193874拮抗TRP通道，对靶点的抑制作用相对对TRPV1、TRPA1、TRPC3、TRPC6和TRPM8的作用来说更具有选择性。用GSK2193874处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)可浓度依赖性地阻止细胞收缩以及抑制由GSK1016790激活TRPV4所导致的细胞脱离。

体内研究

在大鼠和犬类中检测GSK2193874的药代动力学，发现在慢性动物模型中，GSK2193874具有适于口服途径的半衰期和其他特性。（在大鼠中：iv CL = 7.3 mL/min/kg, po t1/2 = 10 h, %F =31；在狗中：iv CL = 6.9 mL/min/kg, po t1/2 = 31 h, %F = 53）。除此之外，在大鼠中，当GSK2193874浓度高达30 mg/kg时，对血压或心率没有作用。在一些心衰模型中，GSK2193874能够改善肺功能。在急性和慢性心衰模型中，GSK2193874的预处理可抑制肺水肿的形成并增强动脉氧合。GSK2193874能够维持内皮细胞的完整性、抑制内皮TRPV4电流，在离体肺和心衰模型中保护肺部免于肺水肿形成。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.4459 mL

7.2294 mL

14.4588 mL

5 mM

0.2892 mL

1.4459 mL

2.8918 mL

10 mM

0.1446 mL

0.7229 mL

1.4459 mL

50 mM

0.0289 mL

0.1446 mL

0.2892 mL

• Cell lines: 稳定转染hTRPV4的HEK细胞(CG27)HUVECs
• Concentrations: 1-30 nM(extracellularly); 0.03-10 uM(intracellularly)
• Incubation Time: —
• Method:

在细胞外，将GSK2193874(1-30 nM)加入培养基中进行处理；在细胞内，通过将GSK2193874(0.03-10 μM)加入电极液中进行处理。在-60和+60 mV之间引出斜坡电流，在GSK634775 (100 nM)激活TRPV4后，检测+60 mV处峰值输出电流。在HUVECs中，在-80和+80 mV之间引出斜坡电流，在GSK2193874 (300 nM)处理后，加入GSK1016790 (30 nM)激活TRPV4，检测+60 mV处峰值输出电流。

动物实验

• Animal Models: 成年雄性SD大鼠
• Formulation: 6% Cavitron
• Dosages: 30 mg/kg
• Administration: 口服填喂

TESTS

SPECIFICATIONS

Appearance

White powder

Identification

HNMR

Purity (HPLC)

≥98%

Nemiralisib，又名GSK-2269557，是有效的、选择性的PI3Kδ抑制剂（pKi=9.9）。

靶点

体内研究

GSK-2269557具有比较低的口服生物利用度（F=2%），在体内的清除率是28 mL/min/kg，但高容积分布，为6.3 L/kg. 0.3-1 μMGSK-2269557诱导浓度依赖性的QT间期和Tp-e延长，1μM GSK-2269557导致ORS波的延长，期间没有观察到尖端扭转心律失常。在brown Norway大鼠的急性OVA疾病模型中，Th2驱动肺部炎症，GSK-2269557能够保护肺部免受嗜酸性粒细胞招募（ED50=67 μg/kg），并浓度依赖性地减少所有白细胞亚种群的招募以及IL-13。

IC-87114

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2699 mL

11.3497 mL

22.6994 mL

5 mM

0.4540 mL

2.2699 mL

4.5399 mL

10 mM

0.2270 mL

1.1350 mL

2.2699 mL

50 mM

0.0454 mL

0.2270 mL

0.4540 mL

Animal Models: Sprague Dawley雄性大鼠
Formulation: DMSO/PEG200/水 (5:45:50 v/v/v)
Dosages: oral:3 mg/kg; IV:1 mg/kg
Administration: 口服/静脉注射

GSK2292767是一种有效的、选择性的PI3Kδ抑制剂。

靶点

体内研究

GSK2292767对PI3Kδ具有高度选择性，在棕色挪威大鼠Th2驱动的肺部炎症OVA模型的相关疾病中具有活性。

BGT226 (NVP-BGT226)

MB5532

BYL719

MB4351

PI-3065

MB5286

PIK-293

MB3879

AS-605240

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9509 mL

9.7546 mL

19.5091 mL

5 mM

0.3902 mL

1.9509 mL

3.9018 mL

10 mM

0.1951 mL

0.9755 mL

1.9509 mL

50 mM

0.0390 mL

0.1951 mL

0.3902 mL

GSK256066是一种选择性的PDE4B(与A-D亚型具有相等的亲和力)抑制剂，IC50为3.2 pM，比作用于PDE1/2/3/5/6选择性高380，000倍以上，作用于PDE4B比作用于PDE7选择性高2500倍以上。Phase 2。

靶点

PDE4B 3.2 pM

体外研究

GSK256066 是缓慢但紧密结合的PDE4B抑制剂，IC50为3.2 pM。GSK256066作用于PBMCs，强有效抑制LPS刺激的TNFα产生，pIC50 为11.0，IC50 为10 pM，GSK256066作用于人全血培养物，pIC50为9.90，IC50为 126 pM。GSK256066高选择性抑制 PDE4(是抑制PDE1,PDE2, PDE3, PDE5, 和PDE6的3.8×105多倍，是抑制PDE7的2.5×103多倍)。GSK256066 同等亲和力抑制PDE4亚型A-D。

体内研究

GSK256066按溶于水悬浮液中给药，抑制LPS诱导的肺中性粒细胞，ED50 为 1.1 μg/kg,按30 μg/kg剂量，则最大抑制72%。GSK256066按干粉制剂给药，抑制LPS诱导的肺中性粒细胞，ED50为2.9 μg/kg,则最大抑制62%。GSK256066 作用于雄性 CD 大鼠，具有温和的血浆清除率，为39 ml/min/kg,适度的分布体积，为0.8 L/kg,及相对短的半衰期，为1.1 小时。GSK256066按按溶于水悬浮液中按30 μg/kg剂量气管内给药处理大鼠，则维持高的肺浓度，为2.6 μg/g。GSK256066按10 μg/kg剂量在不同时间(2, 6, 12, 18, 24, 和 36 h)气管内给药处理，然后再用LPS处理，则抑制脂多糖(LPS)诱导的急性肺炎大鼠模型中LPS诱导的肺部嗜中性。GSK256066按0.3-100 μg/kg剂量处理大鼠，抑制LPS诱导的呼出NO的增高，ED50为35 μg/kg。GSK256066按10 μg/kg 剂量处理大鼠半小时，再使用OVA处理, 则抑制OVA诱导的肺部嗜酸性粒细胞增多，ED50为0.4 μg/kg。

诺普利兰;咯利普兰

MB5676

Apremilast (CC-10004)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9283 mL

9.6417 mL

19.2834 mL

5 mM

0.3857 mL

1.9283 mL

3.8567 mL

10 mM

–

–

–

50 mM

–

–

–

SPA检测和荧光偏振检测:
在SPA检测中，溶于含8.3 mM MgCl2, 1.7 mM EGTA, 和 0.05% (w/v) BSA的50 mM Tris-HCl, pH 7.5中的75 μl PDE 酶与2 μl GSK256066 溶液或DMSO 预温育30分钟。PDE1 检测中，实验buffer 含4 μg/ml 钙调蛋白和1 mM CaCl2，不含任何EGTA。加入25 μl[3H]cAMP (PDE3, PDE4, 和PDE7终浓度为10 nM) 或[3H]cGMP(PDE1,PDE2, PDE5, 和 PDE6终浓度为36 nM)开始实验。温育1小时后，加入50 μl SPA 磁珠的水悬浮液(每孔约为1 mg )终止反应，再温育至少10分钟后，同事液体闪烁计数法测定结合的放射性。荧光偏振检测中，溶于含10 mM MgCl2, 0.1% (w/v) BSA,和 0.05% (w/v) NaN3的10 mM Tris-HCl buffer，pH 7.2中的10 μl PDE酶与0.5 μl GSK25606溶液或DMSO 预温育 30分钟。加入10 μl荧光-cAMP(终浓度为40 nM) 开始检测，40分钟后，通过加入60 μl IMAP 结合试剂终止反应。使用分析仪或 Aquest酶标仪测量平行光与垂直光的比率。

细胞实验 

Cell lines: 原代人外周血单核细胞和全血细胞

• Concentrations: 10 μM
• Incubation Time: 1 小时
• Method: 肝素化血液(100 μl) 与0.5 或 1.0 μl GSK256066 或DMSO（终浓度为0.4或0.8% )在37oC下含5% CO2环境下温育1小时。然后使用1 ng/ml LPS刺激样本，1 ng/ml LPS溶于含10%胎牛血清，1% l-谷氨酸, 和1% 青霉素/链霉素 的RPMI 1640 培养基。加入50 或 100 μl 生理盐水(0.138% NaCl)，在37oC下含5% CO2的环境下温育20小时，1.3×103g下离心10分钟后收集稀释血浆，使用电化学发光检测法测定TNF-α。50μl 全细胞或 PBMC 实验的上清液与50 μl 链霉亲和素/生物素化的抗-TNF-α 抗体混合物, 25 μl 钌标记的抗-TNF-α单克隆抗体，和含 0.1% BSA 的 100 μl PBS温育2小时。在IGEN仪器上读取电化学，从每个实验板的人类重组TNF-α的标准曲线计算 TNF-α浓度。

动物实验

• Animal Models: 雄性CD大鼠
• Formulation: 无菌0.9% NaCl溶液
• Dosages: 0.1-100 μg/kg
• Administration: 气管滴注作为水溶性悬浮液，或使用干粉处理2小时。

451.44

化学式

C24H20F3N5O

CAS号

1337531-36-8

稳定性

3 years -20°C powder

2 years -80°C in solvent

90 mg/mL (199.36 mM)

Ethanol

Ethanol 21 mg/mL (46.52 mM)

Water

<1 mg/mL 难溶或者不溶

GSK2606414 是一种口服具有生物活性的，有效的，选择性PERK抑制剂，IC50 为 0.4 nM，比测试的其他EIF2AKs选择性至少高100倍。

特性

The first PERK-selective inhibitor with good oral bioavailability and crosses the blood-brain barrier.

靶点

体外研究

GSK2606414抑制A459细胞中的PERK 自磷酸化，IC50<0.3 μM。