BV-173细胞，慢性髓样白血病爆炸阶段细胞

注意事项如下:

一 、收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

二、对于贴壁细胞，若细胞漂浮:培养瓶不开封，用75%酒精擦拭后平躺置于培养箱内。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉;如细胞还不贴壁，将细胞离心收集移到新的培养瓶中，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

三、建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和本公司技术部沟通交流。

我们全心全意为您服务，提供优质产品，保障售后服务，真心把客户奉为上帝，及时处理客户订单，全程跟踪货源，采用诚信快递运输，认真解答客户疑问，对客户售后问题，不拖沓，不推卸责任，认真负责的态度。

停滞期(Stagnate Phase):细胞数量达饱和密度后，细胞遂停止增殖，进入停滞期。此时细胞数量不再增加，故也称平顶期(Plateau)。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动，继而培养液中营养渐趋耗尽，代谢产物积累、pH降低。此时需做分离培养即传代，否则细胞会中毒，发生形态改变，重则从底物脱落死亡，故传代应越早越好。传代过晚(已有中毒迹象)能影响下一代细胞的机能状态。在这种情况下，虽进行了传代，因细胞已受损，需要恢复，至少还要再传1~2两代，通过换液淘汰掉死细胞和使受损轻微的细胞得以恢复后，才能再用。结果反而耽误了时间，这是在实验中应特别注意的。

四、原代培养:即*次培养，是指将培养物放置在体外生长环境中持续培养，中途不分割培养物的培养过程。有几方面含义:

培养物一经接种到培养器皿(瓶)中就不在分割，任其生长繁殖;

原代培养中的“代”并非细胞的“代”数，因为培养过程中细胞经多次分裂已经产生多代子细胞;

原代培养过程中不分割培养物不等于不更换培养液，也不等于不更换培养器皿。

正常细胞培养的世代数有限，只有癌细胞和发生转化的细胞才能无限生长下去。所谓转化即是指正常细胞在某种因子的作用下发生突变而具有癌性的细胞。目前世界上许多实验室所广泛传用的HeLa细胞系就是1951年从一位名叫Henrietta Lacks的妇女身上取下的宫颈癌细胞培养而成。此细胞系一直延用至今。

原代培养的细胞一般传至10代左右就不易传下去了，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去，这些存活的细胞一般能够传到40~50代，这种传代细胞叫做细胞株。细胞株的遗传物质没有发生改变,在培养过程中其特征始终保持。当细胞株传至50代以后又会出现“危机”，不能再传下去。但是有部分细胞的遗传物质发生了改变，并且带有癌变的特点，有可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称为细胞系。

BV-173细胞，慢性髓样白血病爆炸阶段细胞

T-47D细胞，人乳腺管癌细胞

CCD-1095Sk细胞，人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞

SK-BR-3*细胞，人乳腺腺癌细胞

SW 1353细胞，人软骨肉瘤细胞

GNM 细胞，人上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌细胞

T6细胞，人舌癌细胞

 TSCCA细胞，人舌鳞癌细胞

CAL 27细胞，人舌鳞癌细胞

Tca-8113细胞，人舌鳞癌细胞

TSCCa细胞，人舌鳞癌细胞

CRT 细胞，人神经胶质瘤细胞

U251细胞，人神经胶质瘤细胞

SH-SY5Y细胞，人神经瘤细胞

BE(2)-M17细胞，人神经母瘤细胞

CRL-2268细胞，人神经母瘤细胞

IMR-32细胞，人神经母瘤细胞

SH-5Y5Y细胞，人神经母瘤细胞

SK-N-AS细胞，人神经母瘤细胞

SK-N-BE(2)细胞，人神经母瘤细胞

SK-N-MC细胞，人神经上皮瘤细胞

A-498细胞，人肾癌细胞

A498-EGFP-puro细胞，人肾癌细胞

ACHN细胞，人肾癌细胞

KC细胞，人肾癌细胞

OS-RC-2细胞，人肾癌细胞

G-401细胞，人肾癌Wilms细胞

SK-NEP-1细胞，人肾母瘤细胞

SW-13细胞，人肾上腺皮质癌细胞

NCI-H295R细胞，人肾上腺皮质腺癌细胞

KP-N-NS细胞，人肾上腺神经母瘤(脑转移)细胞

NCI-H205细胞，人肾上腺腺瘤细胞

786-O(786-0)细胞，人肾透明癌细胞

CaKi-1细胞，人肾透明癌细胞

CaKi-2细胞，人肾透明癌细胞

786-0细胞，人肾透明腺癌细胞

ACHN细胞，人肾透明腺癌细胞

769-P细胞，人肾腺癌细胞

HuTu-80细胞，人十二脂肠腺癌细胞

CaES-17细胞，人食管癌细胞

EC9706细胞，人食管癌细胞

Eca-109细胞，人食管癌细胞

KYSE150细胞，人食管癌细胞

TE-1细胞，人食管癌细胞

原代培养是建立各种细胞系(株)必经的阶段，其是否成功与组织污染与否、供体年龄、培养技术和方法、适宜培养基的选择等多种因素有关。由于原代培养的细胞转化性极小，对病毒敏感性好，因此适应制备疫苗等生物制品;但也存在有潜在外源因子、不能事先检查标本、且受供体年龄健康状况的影响而导致批间差异大等缺陷。目前常用的原代细胞培养有鸡胚成纤维细胞及猪肾、猴肾、地鼠肾等原代细胞。

原代培养的基本过程包括取材、培养材料的制备、接种、加培养液、置培养条件下培养等步骤，在所有的操作过程中，都必须保持培养物及生长环境的无菌。

多数情况下，分散的细胞若属于贴壁依赖型细胞，就能黏附、铺展于培养器皿和载体表面生长而形成细胞单层，这种培养方式称为单层细胞培养(monolayer culture)，又叫贴壁培养(adherent culture)。少数情况下，培养的细胞没有贴壁依赖性，可通过专门设备使细胞始终处于悬状态而在体外生长，这种形式称为悬浮培养(suspension culture)。如何让接种的细胞尽快贴壁，是决定培养成功的关键步骤:

取决于适当的生长基质表面;

可降低接种后培养液对细胞的浮力，如先少补加少量培养液，待细胞贴壁后再补足营养液继续培养;

注意适当的细胞接种密度，一般10⁵个/ml左右。

五、传代培养:当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止;另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿(瓶)内，再进行培养。这个过程就称为传代(passage)或者再培养(subculture)。对单层培养而言，80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。

体外培养技术中所谓的传“代”概念并不等于细胞生物学中“亲代细胞”与“子代细胞”中“代”的概念。传代培养的实质就是分割后再一次培养，可以相对地衡量培养物的培养年龄。

六、生长曲线:细胞接种入培养瓶后，先进入2-24h的延迟期(lag period)，然后进入指数生长期(即对数期)(log phase)，汇合成单层进入缓慢生长或停滞期(即平台期)(plateau lhase)。每种细胞系(cell line)的这些生长期(growth phase)都是特征性的，只要环境条件保持恒定，每一次测定结果应该是可重复的。