SNS-032 (BMS-387032)最初被描述为选择性CDK2抑制剂，无细胞试验中IC50为48 nM，比作用于CDK1/CDK4选择性高10和20倍。它也对CDK7/9敏感，IC50为62 nM/4 nM，对CDK6几乎没有抑制效果。

特性

SNS-032是新一代CDK抑制剂,具有更高的选择性和更弱的毒性。

靶点

体外研究

SNS-032是新型有效的选择性Cdk抑制剂, 有效抑制Cdk2, Cdk7和Cdk9。体外，不管病情预断和治疗病史如何，SNS-032都可有效杀死慢性淋巴细胞性白血病细胞。与Flavopiridol和Roscovitine相比, 抑制RNA合成和诱导细胞凋亡时，SNS-032更有效。SNS-032是可逆的，使SNS-032重激活RNA聚合酶II失活, 导致Mcl-1再合成和细胞存活。SNS-032抑制内皮细胞的三维毛细管网形成。SNS-032作用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs),完全抑制U87MG细胞调节的毛细管形成。此外, SNS-032明显抑制VEGF的产生,从而抑制血管生成。临床前期研究显示SNS-032跨多种细胞系诱导细胞周期停滞和细胞凋亡。SNS-032通过抑制 CDKs 2和7而阻断细胞周期, 通过抑制CDKs 7和9阻断转录。SNS-032的活性不受人类血清影响。 SNS-032诱导膜联蛋白V染色增多和caspase-3激活，这种作用存在剂量依赖性。在分子水平, SNS-032诱导RNA多聚酶(RNA Pol) II 在serine 2和5位点去磷酸化。且抑制CDK2，CDK9。和去磷酸化的CDK7的表达。

体内研究

SNS-032作用于肿瘤共培养模型，阻断肿瘤细胞诱导的VEGF分泌。SNS-032, 作用于实体瘤时具有更高选择性，且毒性较弱。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.6279 mL

13.1396 mL

26.2791 mL

5 mM

0.5256 mL

2.6279 mL

5.2558 mL

10 mM

0.2628 mL

1.3140 mL

2.6279 mL

50 mM

0.0526 mL

0.2628 mL

0.5256 mL

• Cell lines: HUVECs和U87MG细胞
• Concentrations: 0-0.5 mM
• Incubation Time: 24, 48, 或72小时
• Method: U87MG细胞和HUVECs (每孔2000个细胞)接种在96孔板上，终体积为100 ml。24小时后,用不同浓度SNS-032(0-0.5 mM)处理细胞24,48,或72小时。完全处理后, 每孔加入100 mL CTG溶液，室温下黑暗温育20分钟。50 mL溶解物转移到96孔板上，通过POLARstar OPTIMA测定荧光值。计算加入SNS-032后的细胞生长百分数。

SNS-314 Mesylate 是有效的，选择性Aurora A, Aurora B和Aurora C抑制剂，IC50分别为9 nM, 31 nM, 和 3 nM,对Trk A/B, Flt4, Fms, Axl, c-Raf 和DDR2作用效果稍弱。

靶点

Aurora kinases A

Aurora kinases B

Aurora kinases C

IC50

9 nM

31 nM

3 nM

体外研究

SNS-314有效抑制肿瘤细胞系，IC50为1.8到24 nM, 不依赖于细胞的相对Aurora-A或Aurora-B 蛋白水平。SNS-314抑制组蛋白H3在Ser10位点磷酸化作用，使HCT116细胞有丝分裂紊乱。连续用SNS-314和Carboplatin, Gemcitabine, 5-FU, Daunomycin, 和SN-38处理显示出加强的抗增殖效果，SNS-314和Gemcitabine,Docetaxel,或Vincristine联用显示出协同效应。

MK-5108 (VX-689)

MB1641

VX-680/MK-0457，陶扎色替

MB4029

ZM 447439

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8974 mL

9.4869 mL

18.9739 mL

5 mM

0.3795 mL

1.8974 mL

3.7948 mL

10 mM

0.1897 mL

0.9487 mL

1.8974 mL

50 mM

0.0379 mL

0.1897 mL

0.3795 mL

Aurora 生化实验:
加入SNS-314，使用同质时间分辨荧光(HTRF)测定Aurora三种亚型 A, B,和C的激酶活性。使用生物素结合的组蛋白H3肽段作为底物。Aurora-A激酶(7.5 nM)在10 mM Tris-HCl pH 为7.2, 10 mM MgCl2, 0.1% BSA, 0.05% Tween® 20, 1 mM DTT, 120 nM 生物素肽段 ARTKQTARKSTGG-KAPRKQLA-GGK-生物素,及6 μMATP 的混合物中25oC环境下反应1小时。加入200 mM EDTA终止反应。5 nM Aurora-B和Aurora-C, 120 nM 生物素肽, 和300 μM ATP 在25oC下反应1小时。为了测定组蛋白H3的磷酸化,0.2 ng/mL铕结合的抗磷酸化组蛋白H3抗体和 8 nM链酶亲和素-XL665 在25oC下温育45分钟。使用Analyst®AD测定产品。在330-370 nm处测定铕结合的轭的抗体。在620和665nm处分别测定穴状化合物和荧光共振能量转移(FRET) 释放物。使用GraphPad Prism获得IC50曲线和IC50值。

细胞实验

• Cell lines: 人类结肠直肠(HCT116, HT29), 肺(Calu-6, H1299), 前列腺(PC-3), 卵巢(A2780), 乳腺(MDA-MB-231),子宫(HeLa), 胰脏(MIA PaCa-2), 及恶性黑色素瘤(A375) 细胞系。
• Concentrations: 10-6 到1 μM
• Incubation Time: 96小时
• Method: 细胞和各种浓度SNS-314一起温育96小时后，加入BrdU在37oC下再温育2小时。测定BrdU 的合并率。在 SpectraMax Gemini XS 计数板上测定化学荧光。通过实验值(SNS-314 处理)与对照值 (DMSO处理) 之比百分数测定细胞增殖。

动物实验

• Animal Models: 携带HCT116, MDA-MB-231, PC-3, H1299和Calu-6, A2780移植瘤的雌鼠
• Formulation: 20% Captisol®(磺基丁基醚 β-环式糊精).
• Dosages: 25.5到170 mg/kg
• Administration: 腹腔注射