492.57

化学式

C29H28N6O2

CAS号

1100598-32-0

稳定性

3 years -20°C powder

2 years -80°C in solvent

别名

MSC2156119

5 mg/mL warmed (10.15 mM)

Water

<1 mg/mL 难溶或者不溶

Ethanol

<1 mg/mL 难溶或者不溶

Tepotinib (EMD 1214063)是一种有效的，选择性的c-Met抑制剂，IC50为4 nM，作用于c-Met比作用于IRAK4， TrkA， Axl， IRAK1和Mer选择性高200倍以上。Phase 1。

靶点

体外研究

EMD 1214063抑制A549细胞中HGF诱导的c-Met磷酸化，IC50为6 nM。EMD 1214063治疗诱导EBC-1细胞中c-Met组成的磷酸化显著减少，IC50为9 nM。EMD 1214063有效阻断c-Met酶主要下游效应蛋白的磷酸化，比如Grb2，Gab1，Sos，PLCγ，和磷脂酰肌醇3激酶，在EBC-1，MKN-45，和Hs746T细胞中，范围为1到10 nM。EMD 1214063大大抑制MKN-45细胞的活性，IC50低于1 nM。用EMD 1214063 (0.1 nM)处理会抑制HGF诱导的NCI-H441细胞移行，而100 nM到1 μM的浓度几乎对其完全抑制。

体内研究

EMD 1214063以10毫克/千克或更高的剂量治疗，导致Hs746T异种移植肿瘤中超过90%的c-Met磷酸化至少在72小时内被抑制。EMD 1214063诱导细胞周期蛋白D1的表达减少50%以上，在100毫克/千克剂量下处理，该作用能够持续96小时以上。EMD 1214063处理后，也能观察到短暂的p27感应和裂解的胱天蛋白酶-3。EMD 1214063 (15 毫克/千克，每天)治疗诱导c-Met扩增，过度表达，并以配体无关的方式被激活的胃癌异种移植物Hs746T完全消退。

TESTS

SPECIFICATIONS

Appearance

Off white powder

Identification

HNMR

Purity(HPLC)

≥98%

产品描述

ML265是一种有效的PKM2激活剂，AC50为92 nM。相对于PKM1、PKR和PKL，对PKM2具有高选择性。

靶点

PKM2 

体外研究

ML265在体外有效地激活PKM2，AC50为92 nM，其选择性比对其他3种丙酮酸激酶亚型高。ML265结合在PKM2同源四聚体的二聚体-二聚体交界面。它能在过矾酸钠处理过的细胞裂解液中激活PKM2 (过矾酸钠可抑制PKM2活性)。在低氧条件下，ML265显著地增长H1299细胞的倍增时间，但在常氧情况下无此作用。

体内研究

在体内，ML265具有有效的血药浓度，在24小时内都能在血液中维持高浓度。ML265具有良好的口服生物利用度、低清除率、长半衰期和良好的分布容积。在7周龄的小鼠移植瘤模型（H1299小鼠移植瘤）中，ML265激活PKM2能够显著地减小肿瘤大小、降低肿瘤的发生，而没有明显的急性毒性。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.6849 mL

13.4243 mL

26.8485 mL

5 mM

0.5370 mL

2.6849 mL

5.3697 mL

10 mM

0.2685 mL

1.3424 mL

2.6849 mL

50 mM

0.0537 mL

0.2685 mL

0.5370 mL

激酶实验

PKM2 activity assay:

Pyruvate kinase activity is measured by monitoring pyruvate-dependent conversion of NADH to NAD+ by lactate dehydrogenase (LDH). Briefly, for cell line experiments, the medium is replaced with fresh medium 1 hr prior to the start of treatment with DMSO or activator. Also, where indicated, 100 μM pervanadate is added 10 min prior to cell lysis. Cells are lysed on ice with RIPA buffer containing 2 mM DTT and protease inhibitors and clarified by centrifugation at 21,000 × g. 5 μL of the supernatant is used to assess pyruvate kinase activity. Pyruvate kinase activity was subsequently normalized for total protein content.

细胞实验

Cell lines: H1299细胞

Concentrations: 50 μM

Incubation Time: 1 h

Method:用50 μM ML265处理H1299细胞1小时，裂解细胞，进行双向电泳，Western blot分析。

动物实验

Animal Models: 雄性Balb/c小鼠

Dosages: IV: 1 mg/kg, PO: 10 mg/kg; IP: 10和50 mg/kg

Administration: IV, IP, PO