Epothilone B 是类似Taxol的microtubule（微管）稳定剂，EC0.01为1.8 μM。

靶点

微管蛋白

IC50

1.8 μM (EC0.01)

体外研究

Epothilone B 比 Epothilone A活性高。Epothilone B 的EC0.01为1.8 nM。Epothilone B 作用于HCT116细胞，有效抑制细胞增殖，IC50为0.8 nM。Epothilone B 作用于KB3-1, KBV-1, Hela,和 Hs578T细胞，诱导细胞周期停顿，且具有细胞毒性，IC50为3 nM 到92 nM。Epothilone B与紫杉醇竞争性与微管结合,IC50为3.3 μM。3.5 nM Epothilone B 作用于过量表达GFP-α-微管蛋白的MCF-7细胞， 充分抑制微管动力学。同时，Epothilone B诱导有丝分裂停滞，IC50 为3.5 nM。Epothilone B 作用于多发性骨髓瘤(MM)细胞,包括RPMI 8226, U266, MM.1S, LR5,和 MR20,直接抑制细胞增殖,IC50为1 nM到 10 nM。10 nM Epothilone B也诱导细胞周期停滞和细胞凋亡。最新研究显示, 5 nM–100 nM Epothilone B作用于卵巢癌Hey细胞,增强表面上皮细胞粘附抗原(EpCAM)。

体内研究

Epothilone B 按 2.5 mg/kg–4 mg/kg 剂量作用于携带RPMI 8226细胞移植瘤的小鼠，延长小鼠寿命且抑制肿瘤生长。Epothilone B 作用于携带前列腺癌细胞，包括DU145和PC3的移植瘤小鼠，也抑制肿瘤生长。

特征

Epothilone B是类似紫杉醇的抗癌常规化合物，诱导微管蛋白聚合。

埃博霉素A

MB6782

埃博霉素C

MB1821

埃博霉素D

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9697 mL

9.8487 mL

19.6974 mL

5 mM

0.3939 mL

1.9697 mL

3.9395 mL

10 mM

0.1970 mL

0.9849 mL

1.9697 mL

50 mM

0.0394 mL

0.1970 mL

0.3939 mL

微管蛋白聚合实验:
纯化牛脑微管蛋白(MTP), 包含约15%–20%微管相关蛋白。用于 Epothilone B-微管研究的buffer (MES buffer)含 0.1 M 2-吗啉乙磺酸(MES), 1 mM EGTA, 0.5 mM MgCl2, 和3 M 甘油，pH 为6.6。电子显微镜观察的样本置于碳覆盖火棉胶片包被的网格上(300 个网孔)，用2%乙酸铀酰进行负染色。在有或无Epothilone B存在时， 使用分光光度计和恒温调节液体循环器。检测微管装配。温度维持在35oC，350 nm处检测到变浑浊状态(代表聚合物规模)。计算EC0.01。

细胞实验

• Cell lines: KB3-1, KBV-1, Hela, 和Hs578T细胞
• Concentrations: 0–1 μM
• Incubation Time: 24 小时测定有丝分裂停顿,72 小时测定细胞毒性。
• Method: 为了测定有丝分裂受阻和畸变，细胞接种在48孔板中(用台酚蓝染色，测定细胞数)或置于盖玻片上。24小时后,用 Epothilone B处理细胞，在固定时间间隔记录。为了分析毒性, 测定细胞数，用台酚蓝染色记录阳性和阴性。 同时, 盖玻片和培养基上清液中等分的细胞混合，用溶于PBS的Hoechst 33342 染色。在有丝分裂受阻（停在G2-M期）和畸变的时候记录细胞。

动物实验

• Animal Models: 携带RPMI 8226 细胞移植瘤的小鼠
• Formulation: 溶于30% PEG-300
• Dosages: 2.5 mg/kg–4 mg/kg
• Administration: 静脉注射