Diphenyleneiodonium chloride (DPI)是NADPH oxidase的抑制剂，也是有效的、不可逆的iNOS/eNOS抑制剂。

靶点

NADPH oxidase

体外研究

DPI抑制NADPH oxidase、一氧化氮合成酶、黄嘌呤氧化酶和NADPH细胞色素P450氧化还原酶的活性。飞摩尔级别的DPI即可通过抑制ERK调节的PHOX活性、抑制小胶质细胞的激活，发挥其抗炎活性和神经保护作用。DPI常被用于抑制由多种黄素酶介导的ROS生成。NADPH, NADP+, and 2’5′-ADP可阻止DPI的抑制活性。对ARPE-19细胞处理以DPI可引起剂量依赖性和时间依赖性的生长抑制，诱导DNA断裂和促凋亡因子Bax的蛋白水平。除此之外，DPI还可显著地诱导p53的表达和其磷酸化，在DNA损伤或无法修复的DNA周期阻滞中，诱导促凋亡基因的表达

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.1791 mL

15.8957 mL

31.7914 mL

5 mM

0.6358 mL

3.1791 mL

6.3583 mL

10 mM

0.3179 mL

1.5896 mL

3.1791 mL

50 mM

–

–

–

• Cell lines: ARPE-19细胞
• Concentrations: 0.1, 1, 10 μM
• Incubation Time: 6, 12, 24, 48 h
• Method:

将ARPE-19细胞以1×106 / 60-mm皿的密度铺于细胞培养皿，培养24小时。将细胞孵育在新鲜的含10% FBS的DMEM/F12培养基中，加入不同浓度的DPI。孵育过后，将细胞胰蛋白酶解，PSB洗涤，通过台盼蓝拒染实验检测活细胞数目。

动物实验

• DDY小鼠（6至7周龄）在实验前分别放置在透明笼子中30分钟。将10μl二苯基氯化钕（2 mm，溶剂：KoLiPHOL EL，20% DMSO）注射到右后肢中，在注射氯化二苯基碘铵0.5小时之前或不加腹腔注射HC0300 31（300 mg/kg；溶剂：生理盐水W）。0.5%甲基纤维素）。在注射后45分钟记录舔或咬住注射爪的时间。