TESTS

SPECIFICATIONS

Appearance

A crystalline powder

Identification

HNMR

Purity (HPLC)

≥98%

CCG-1423是一种特定的 RhoA 通路抑制剂，能够抑制SRF介导的转录。

靶点

RhoA

体外研究

CCG-1423选择性抑制SRF介导的被Rho信号通路激活的转录， 并特异性抑制LPA刺激的DNA合成。CCG-1423也能够选择性抑制RhoC过表达的黑色素瘤细胞(A375M2 和 SK-Mel-147)的增殖，并强烈抑制PC-3细胞的Rho依赖性侵袭。CCG-1423与LY294002结合通过BMP7阳性细胞增强小鼠胚胎干细胞分化为中间中胚层。在H9c2细胞中，CCG-1423抑制MRTF核定位，并完全阻断STARS近端报告基因活性。CCG-1423，作为一种Rho/MRTF/SRF信号通路抑制剂，也会抑制人结肠肌成纤维细胞中基质僵硬和TGF-β诱导的纤维增生。

细胞系

过表达RhoC (A375M2和SK-Mel-147)的黑色素瘤细胞系，低RhoC表达的细胞系(A375和SK-Mel-28)，转化的(SW962，PC-3，和SKOV-3)和非转化的(WI-38)细胞系。

浓度

300 nM

处理时间

72小时

方法

正常培养基中的细胞接种(2,000每孔)于laminin涂覆的96孔板。附着后，培养基用含30 μmol/L LPA，包含或不包含300 nM CCG-1423的无血清培养基(0% FBS)取代。新鲜LPA与CCG-1423或仅新鲜LPA在第5天加入以确保整个实验中LPA和化合物都存在。在第8天，孔中加入WST-1试剂，1小时后，450 nm下的吸光度使用Victor板阅读器读取。

CCT007093 是强效的PPM1D (WIP1)抑制剂，其IC50为 8.4 μM。

靶点

体外研究

CCT007093选择性有效抑制过表达PPM1D的人肿瘤细胞系(MCF-7，KPL-1，和MCF-3B)。CCT007093通过激活p38激酶的活性诱导细胞死亡。CCT007093与紫杉醇结合，对4种耐紫杉醇的三重阴性乳腺癌(TNBC)细胞系产生协同抑制作用。CCT007093选择性促进乳腺癌细胞和皮肤转化的异位表达Wip1的角质细胞的细胞凋亡， 同时减弱皮肤角质细胞和Wip1裸细胞模型中UV介导的凋亡应答。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.6712 mL

18.3560 mL

36.7121 mL

5 mM

0.7342 mL

3.6712 mL

7.3424 mL

10 mM

0.3671 mL

1.8356 mL

3.6712 mL

50 mM

–

–

–

体外磷酸酶试验:
重组PPM1D (20-50 pmol)在Tris缓冲液(50 mM，pH 8)，NaCl (100 mM)，β-巯基乙醇 (1 mM) 或 DTT (1 mM) 中稀释，并用MnCl2 (0, 1, 10 and 20 mM) 或MgCl2 (0 和 40 mM)处理。在适当情况下，加入抑制剂PPM1D(10-50 μM)，试验混合物在室温下培育30分钟。然后加入重组磷酸化的P38 (200 pmol)，混合物在37℃下培育1小时。反应通过加入过量乙二胺四乙酸(EDTA)淬灭，十二烷基硫酸钠样品装载缓冲液，并在95℃下煮沸5分钟，然后凝胶电泳并蛋白免疫印记法测定。

细胞实验：

• Cell lines: MCF-7，KPL-1，和 MCF-3B 细胞
• Concentrations: ~50 μM
• Incubation Time: 14天
• Method: 细胞用pSUPER质粒转染，额外的质粒表达，杀稻瘟素耐药基因(pEFBsd)摩尔比为10:1。将细胞接种在10厘米板中，转染24小时后。杀稻瘟素选择(5 微克/毫升)在转染48小时后起始，每3天重新加满。菌落固定在甲醇中，14天后用结晶紫着色。将菌落在Colcount上定量，测定存活比率(SF)。

CCT137690是高选择性Aurora A, Aurora B和Aurora C抑制剂，IC50分别为 15 nM, 25 nM 和 19 nM，对hERG离子通道几乎没有作用效果。

靶点

Aurora-A

Aurora-B

Aurora-C

IC50

15 nM

25 nM

19 nM

体外研究

CCT137690作用于多种人类肿瘤细胞系具有抗增殖活性，包括SW620结肠癌细胞和A2780卵巢癌细胞，GI50分别为0.3和0.14 μM。此外 CCT137690也抑制组蛋白H3的磷酸化作用。CCT137690抑制主要的细胞色素P450亚型(CYP1A2,CYP2A6,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6, CYP3A4)，IC50值大10 μM。然而，CCT137690是hERG离子通道的适度抑制剂，IC50为3.0 μM。CCT137690 有效抑制人类不同器官肿瘤细胞系的生长，GI50值为0.005到0.47 μM。CCT137690完全抑制Aurora A在T288位点自磷酸化，0.5 μM时也且抑制组蛋白H3磷酸化。CCT137690 作用于HCT116细胞，诱导多倍体，有丝分裂畸变，凋亡。CCT137690作用于KELLY成神经细胞瘤细胞系，降低MYCN水平，和GSK3β磷酸化。CCT137690抑制FLT3自磷酸化，和下游靶点STAT5和p44/42 MAPK(Erk1/2)的磷酸化。CCT137690作用于FLT3-ITD阳性AML，抑制Aurora 和FLT3激酶，诱导凋亡，且导致细胞周期呈现为在在G2/M期累积。

体内研究

体内，口服处理CCT137690，抑制SW620结肠癌移植瘤的生长，且没有明显的细胞毒性。在转基因鼠成神经细胞瘤模型中过量表达MYCN蛋白，且易自发形成成神经细胞瘤, CCT137690明显抑制肿瘤生长。此外, CCT137690 有效抑制皮下MOLM-13移植瘤, 且没有明显毒性，体重也没降低。

特征

CCT137690是口服有效性的抑制剂，具有合理的药物动力学参数。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8133 mL

9.0665 mL

18.1330 mL

5 mM

0.3627 mL

1.8133 mL

3.6266 mL

10 mM

–

–

–

50 mM

–

–

–

激酶实验:
使用384孔基础板®作为固体实验平板。用溶于PBS的100 μg/mL二硫苏糖醇(DTT)包被板，在4 oC下过夜，用PBS冲洗两次后使用。溶于2% DMSO的5 μL CCT137690加到每孔中，随后加入15 μL激酶(50 mM Tris pH 为7.5, 10 mM NaCl, 2.5 mM MgCl2, 1 mM髓鞘碱性蛋白(MBP), 20 μM ATP, 及0.025 μCi/μL 33P-ATP)。 最后，每孔加入 250 ng Aurora-A 酶。震荡2分钟，然后在室温下温育2小时。用10 mM焦磷酸钠冲洗板两次，终止反应。在TopCount-NXTTM读数。测定CCT137690作用于Aurora-B或Aurora-C的抑制活性, 实验条件相同，使用Aurora-B或Aurora-C酶。

细胞实验

Cell lines: SW620, A2780,和HCT116细胞

• Concentrations: 0到50μM
• Incubation Time: 72小时
• Method: 使用比色分析MTT实验分析CCT137690作用于细胞增殖的效果。人类结肠癌细胞系(HCT116, Colo205, SW620, HT29, KW12)按每孔2.5×103个细胞接种在96孔板上，用0到50μM梯度浓度CCT137690处理72小时。使用Wallac VICTOR2TM 1420多标记计数器在570 nm处测定吸光值。

动物实验

Animal Models: 携带SW620人类结肠瘤的雌性CrTac:NCr-Fox1(nu)无胸腺鼠

• Formulation: DMSO-Tween-盐水
• Dosages: 75 mg/kg
• Administration: 口服处理，每天两次，持续21天。 

西地尼布马来酸盐  Cediranib maleate (AZD-2171 maleate) 是高选择性，有口服活性的 VEGFR2 抑制剂，对Flt1，KDR，Flt4，PDGFRα，PDGFRβ，c-Kit的 IC50 值分别为小于1， 小于3，5，5，36，2nM。

靶点

体外研究

在人脐静脉内皮细胞中，Cediranib抑制vegf刺激的增殖和KDR磷酸化，IC50分别为0.4和0.5 nM。在成纤维细胞/内皮细胞的血管发芽共培养模型中，Cediranib在亚纳米极浓度下也减少了血管的面积、长度和分支。

体内研究

每日口服Cediranib消融实验性血管生成(vegf诱导)，抑制骨内软骨骨化或卵巢黄体发育;高度依赖新血管形成的生理过程。在胸腺小鼠中建立的人类肿瘤异种移植(结肠、肺、前列腺、乳房和卵巢)的生长被Cediranib剂量依赖性地抑制，每天每公斤1.5 mg的慢性剂量对所有模型产生显著的抑制作用。对用Cediranib治疗的Calu-6肺肿瘤的组织学分析显示，在52小时内微血管密度降低，随着治疗时间的延长，微血管密度逐渐增大。这些变化预示着肿瘤内血管的退化

西地尼布;AZD2171

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.7650 mL

8.8249 mL

17.6498 mL

5 mM

0.3530 mL

1.7650 mL

3.5300 mL

10 mM

0.1765 mL

0.8825 mL

1.7650 mL

50 mM

0.0353 mL

0.1765 mL

0.3530 mL

针对一系列重组酪氨酸激酶[KDR，Flt-1，Flt-4，c-Kit，PDGFR-α，PDGFR-β，CSF-1R，Flt-3，FGFR1，Src，Abl）测定西地尼布的抑制活性。 ，表皮生长因子受体（EGFR），ErbB2，Aur-A和Aur-B]使用ELISA方法

细胞实验

制备头孢地尼作为DMSO中的10毫米原液，并在相关的分析介质中稀释。 
PDGF-AA诱导MG63骨肉瘤细胞增殖，选择性激活PDGFR-α同型二聚体信号。细胞在DMEM中培养，不含酚醛红，含有1%的炭脱除FCS、2 mL谷氨酰胺和1%个非必需氨基酸24小时。CediRANIB或载体加入PDGF-AA配体（50 ng/ml），再加入72小时的平板。用溴脱氧尿苷测定细胞增殖

动物实验

小鼠： 
Cediranib悬浮于1%（W/V）聚山梨酯水溶液80（聚氧乙烯；去离子水中山梨糖醇单油酸酯）中，并以0.1毫升/ 10克体重给药。对于大鼠的研究，Cediranib悬浮于0.5%（W/V）羟丙基甲基纤维素溶液中，含有0.1%（W/V）聚山梨酯水溶液80，并以5 mL/kg体重给予。 
大鼠： 
年轻女性奥德利公园大鼠（6周龄，Wistar衍生，n＝5）口服给药，每天一次，用Cediranib（每天25mg/kg每公斤）或车辆28天。额外的大鼠（每组五只）用头孢地尼（每天5毫克/公斤）或车辆治疗28天，并在不治疗的情况下再维持28天，以检查复合撤退的效果。组织学石蜡切片的股骨胫关节和卵巢染色H＆E。形态计量分析的股骨胫节部分，生长板区从股骨和胫骨在每个关节联合起来分析复合治疗的效果。H和E染色卵巢切片中的黄体面积同样通过形态计量学分析确定。

TESTS

SPECIFICATIONS

RESULTS

Appearance

White to off white powder

Conforms

Solubility

33mg/ml Ethanol，clear

Conforms

UV

λmax=254nm

254nm

M.P.

160~165℃

161.5~162.5℃

Purity(HPLC)

≥98%

98.55%

Conclusion

Passed

CeMMEC1 is an inhibitor of BRD4, and also has high affinity for TAF1, with an IC50 of 0.9 μM for TAF1, and a Kd of 1.8 μM for TAF1 (2).

IC50 & Target

Kd: 1.8 μM (TAF1 (2)) IC50: 0.9 μM (TAF1)

体外

CeMMEC1 is an inhibitor of BRD4, and also has high affinity for TAF1, with an IC50 of 0.9 μM for TAF1, and a Kd of 1.8 μM for TAF1 (2) and slso shows high affinity for the bromodomains of CREBBP, EP300, BRD9. CeMMEC1 (1, 10, 20 μM) decreases the number of THP1 cells in S phase in a dose manner. CeMMEC1 also induces apoptosis. CeMMEC1 in combination with (S)-JQ1 displays potently impaired cell viability than treatment alone.

Bendamustine HCl

MB1057

Cladribine

MB1055

顺铂

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.9732 mL

14.8659 mL

29.7318 mL

5 mM

0.5946 mL

2.9732 mL

5.9464 mL

10 mM

0.2973 mL

1.4866 mL

2.9732 mL

CEP-32496是一种高度有效的BRAF(V600E/WT)和c-Raf抑制剂，Kd为14 nM/36 nM和39 nM，适度有效作用于Abl-1， c-Kit， Ret， PDGFRβ和VEGFR2，对MEK-1， MEK-2， ERK-1和ERK-2具有微弱的亲和力。

特性

对BRAF（V600E）突变型和相关的c-Raf具有高的结合亲和力，而对MAPK通路的其它关键激酶，包括MEK-1，MEK-2，ERK-1和ERK-2无显著的亲和力。

靶点

体外研究

CEP-32496抑制A375细胞(BRAFV600E) 增殖， EC50为78 nM。CEP-32496作用于肿瘤细胞系，对表达突变型BRAF的A375, SK-MEL-28, Colo-205, Colo-679, 和HT-144细胞比表达野生型BRAF的HCT116, Hs578T, LNCaP, DU145, 和PC-3细胞具有更敏感的细胞毒性作用。CEP-32496作用于人类黑色素瘤（A375）和结肠直肠癌（Colo-205）细胞系，抑制MAPK/MEK磷酸化，IC50分别为 78 nM 和 60 nM。

体内研究

CEP-32496处理小鼠，狗，猴和人肝微粒制品，具有良好的稳定性，测量的内在清除率为<23 (μL/min)/mg，t1/2为>60 分钟。CEP-32496按30 mg/kg剂量口服处理给药携带Colo-205移植瘤的小鼠模型，每天两次，肿瘤生长停滞，部分肿瘤消退(PRs)的发生率为40％，而按100 mg/kg剂量处理，则肿瘤生长停滞，部分肿瘤消退(PRs)的发生率为80％。CEP-32496按30 mg/kg剂量口服处理肿瘤裂解物，每天两次，在给药时间点厚2小时和6小时，分别抑制50％和75％归一化的pMEK，而按55 mg/kg剂量处理给药携带Colo-205移植瘤的小鼠模型， 抑制57％到75％pMEK。CEP-32496处理多个临床前物种具有良好的口服生物利用度（大鼠，狗和猴> 95％）。CEP-32496(100 mg/kg)处理携带BRAF(V600E)结肠癌移植瘤的裸鼠，抑制pMEK和pERK，使肿瘤持续生长停滞和衰退。

达拉菲尼,达帕菲尼

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9325 mL

9.6626 mL

19.3252 mL

5 mM

0.3865 mL

1.9325 mL

3.8650 mL

10 mM

0.1933 mL

0.9663 mL

1.9325 mL

50 mM

–

–

–

结合实验:
结合反应在室温下进行1小时，通过捕获固定化的亲和配体，测定未与实验化合物结合的激酶组分，通过定量PCR检测进行定量分析。分别测定CEP-32496作用于每种激酶的效果。使用11种连续3倍稀释液测定Kd值，并表示为实验按一式两份进行的平均值。各个值之间的变异性小于2倍。

细胞实验：

• Cell lines: A375 细胞系
• Concentrations: 78 nM
• Incubation Time: 72 小时
• Method: 细胞按每孔104个细胞接种在含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行培养。使用PBS洗涤细胞，更换为含0.5%血清的DMEM培养基，温育过夜。加入不同浓度CEP-32496，DMSO 终浓度为0.5%，温育72小时。温育末期，加入Cell Titer Blue，再温育3小时。使用SoftMax Pro (激发波长为560 nm，发射波长为590 nm) 测量荧光信号的强度，对剩余的存活细胞进行定量。使用含有Igor Pro 的9点曲线推算IC50值，并且表示为实验按一式两份进行的平均值。各个值之间的变异性小于2倍。

动物实验：

• Animal Models: 携带Colo-205移植瘤的小鼠模型
• Formulation: 22% HPβCD
• Dosages: 100 mg/kg
• Administration: 口服饲喂

CEP-33779是一种选择性JAK2抑制剂，IC50为1.8 nM，比作用于JAK1和TYK2选择性高40多倍和800多倍。

靶点

体外研究

在HEL92 细胞中，CEP33779(<3 μM)浓度依赖性抑制下游靶点信号转换器的磷酸化和JAK2的5(pSTAT5)转录激活。

体内研究

来自HEL92异种移植小鼠体内的HEL9肿瘤提取物中，CEP33779以55 mg/kg的剂量口服给药抑制STAT5磷酸化。在胶原-抗体诱导性关节炎(CAIA)或胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠体内，CEP33779以55 mg/kg的剂量，每天两次口服给药减少平均足肿胀和临床症状。CEP33779以55 mg/kg的剂量每天两次口服给药完全抑制CAIA 或CIA小鼠爪子磷酸-STAT3表达，与细胞因子，包括IL-12，IFNγ，IL-2，IL-1β，TNFα和GM-CSF的减少相关。CAIA 或CIA小鼠体内，CEP33779剂量依赖性减少骨退化，组织破坏和骨关节炎。在MRL/lpr全身性红斑狼疮小鼠体内，CEP33779以100 mg/kg口服给药延长生存期，并减少脾肿大/淋巴肿大，从而保护小鼠避免发展为肾小球性肾炎。在MRL/lpr全身性红斑狼疮小鼠体内，CEP33779以100 mg/kg口服给药减少几个SLE相关的促炎性细胞因子，并降低与破骨细胞活性增加相关的骨吸收生物标志物的水平。在结肠炎诱导的结直肠炎小鼠模型中，CEP33779以55 mg/kg的剂量每天两次口服给药，诱导已建立的结直肠肿瘤退化，减少血管生成，并减少肿瘤细胞的增殖。肿瘤退化与STAT3和NF-κB (RelA/p65)活化的抑制，促炎性细胞因子表达的减少，以及促进肿瘤的细胞因子白介素(IL)-6和IL-1β 的减少相关。

AZD1480

MB3926

Baricitinib (LY3009104, INCB028050)

MB4568

BMS-911543

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.1618 mL

10.8092 mL

21.6183 mL

5 mM

0.4324 mL

2.1618 mL

4.3237 mL

10 mM

0.2162 mL

1.0809 mL

2.1618 mL

50 mM

0.0432 mL

0.2162 mL

0.4324 mL

• Animal Models: 胶原诱导性关节炎(CIA)和胶原-抗体诱导性关节炎(CAIA)小鼠
• Formulation: 二甲基亚砜(DMSO) (1% 终浓度)
• Dosages: 55 mg/kg
• Administration: 每天两次，口服给药

LDK378 2Hcl是ALK抑制剂，IC50为0.2 nM，比对IGF-1R和InsR的抑制性高40倍和35倍。

靶点

ALK

IC50

0.2 nM

体外研究

LDK378在Ba/F3-NPM-ALK和Karpas290细胞中表现出很强的增殖活性，IC50分别是26.0 nM和22.8 nM，在Ba/F3-Tel-InsR和Ba/F3-WT细胞中，IC50分别是319.5 nM 和2477 nM。

体内研究

LDK378可降低形成活性代谢物的可能性，并且在肝微粒中表现出谷胱甘肽（GSH）的加合物（<1％）无法检测。LDK378具有较好代谢稳定性，表现适度CYP3A4抑制性和hERG抑制性，LDK378在动物体内（小鼠、大鼠、狗和猴）表现出低血浆清除作用，口服生物利用度在55%以上。在Karpas299和H2228大鼠异种移植模型中，LDK378可引起生长抑制和肿瘤消退且无体重损失。LDK378在小鼠长期小于100 mg/kg给药后，表现出对胰岛素水平或血浆葡萄糖利用无影响。

PF-06463922

MB2148

TAE684

MB3641

SD-208