产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白磷酸酶
Sodium Orthovanadate (Vanadate)
#P0758L 5 ml
#P0758S 1 ml
Description
Properties and Usage
Notes
References
分类目录归档：NEB糖生物学与工具
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白激酶,cAMP 依赖性蛋白激酶PKA,催化亚型,#P6000L
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白激酶
cAMP 依赖性蛋白激酶（PKA），催化亚型
#P6000L 500,000 units.
#P6000S100,000 units
相关产品
5´ -三磷酸腺苷（ATP）
概述
可逆性地在蛋白质上添加磷酸基对真核细胞信号转导起着重要作用，蛋白磷酸化和去磷酸化参与调节细胞活动的各个方面。随着已知蛋白激酶数量飞速增长，确定细胞中哪种蛋白激酶与哪种底物相互作用就变得更具挑战性。通过对比磷酸化位点的氨基酸序列与已知底物序列来找到的共有磷酸化位点序列已被证实是一种有效方法，这些序列有助于预测潜在的蛋白质底物中特定蛋白激酶磷酸化位点。
由于决定蛋白激酶特异性涉及复杂的三维结构，这些较短的氨基酸序列只描述了磷酸基接受位点周围的一级结构，因此把问题简单化了（见综述 1），没有考虑到二级及三级结构，也没有考虑到其它多肽链或者同链中位置稍远处的因素，此外，在特定序列中并不是所有残基对于激酶的识别及磷酸化具有同等影响，因此，使用这些序列时应该慎重。
另一方面，这些共有序列已经被证实是识别的关键序列，简单化了的序列使得它们在研究蛋白激酶与其底物中更有用。基于共有序列合成的寡肽，除了能预测磷酸化位点以外，往往还是蛋白激酶活性测定的理想底物。
下表列出了 NEB 提供的蛋白激酶特异性序列，磷酸基接受位点用红色标出，可以进行功能替换的氨基酸用斜红色（/）标出，对识别贡献不大的氨基酸用“X”表示。
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白激酶,酪氨酸激酶 II,CK2,#P6010L
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白激酶
酪氨酸激酶 II（CK2）
#P6010L 50,000 units
#P6010S 10,000 units
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由于决定蛋白激酶特异性涉及复杂的三维结构，这些较短的氨基酸序列只描述了磷酸基接受位点周围的一级结构，因此把问题简单化了（见综述 1），没有考虑到二级及三级结构，也没有考虑到其它多肽链或者同链中位置稍远处的因素，此外，在特定序列中并不是所有残基对于激酶的识别及磷酸化具有同等影响，因此，使用这些序列时应该慎重。
另一方面，这些共有序列已经被证实是识别的关键序列，简单化了的序列使得它们在研究蛋白激酶与其底物中更有用。基于共有序列合成的寡肽，除了能预测磷酸化位点以外，往往还是蛋白激酶活性测定的理想底物。
下表列出了 NEB 提供的蛋白激酶特异性序列，磷酸基接受位点用红色标出，可以进行功能替换的氨基酸用斜杠（/）标出，对识别贡献不大的氨基酸用“X”表示。
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,O-糖蛋白酶,#P0761S
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶
O-糖蛋白酶
#P0761S 200 reactions
产品描述
O-糖蛋白酶是一种高度特异性的蛋白酶，用于切割糖蛋白或糖肽上的肽键，该酶特异性识别粘蛋白型 O-连接糖（无论是否唾液酸化）的丝氨酸或苏氨酸残基，在其 N端进行切割。
产品特点
·用于 O-糖基化位点测定和 O-糖结构测定
·有效切割糖蛋白（无论是否唾液酸化），无需神经氨酸酶处理
·为重组酶，无其它蛋白酶污染
·可在变性或非变性条件下使用
·不含甘油，便于在 HPLC 和 MS 分析中取得最佳效果。
·以溶液形式提供；具有长达 24 个月的最佳活性和稳定性
产品说明
O-糖蛋白酶是一种高度特异性的蛋白酶，用于切割糖蛋白或糖肽上的肽键，该酶特异性识别粘蛋白型 O-连接糖（无论是否唾液酸化）的丝氨酸或苏氨酸残基，在其 N 端进行切割。O-糖蛋白酶含有 6 × His-tag，使用镍亲和树脂可轻松从反应体系中去除
来源：
基因克隆自铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa），在 E. coli 中表达。
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,Xa 因子蛋白酶,#P8010L
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶
Xa 因子蛋白酶
#P8010L 250 μg
#P8010S 50 μg
#P8010V 25 μg
识别位点
概述
Xa 因子蛋白酶的常见切割位点位于 Ile-(Glu/Asp)-Gly-Arg 序列中的精氨酸残基之后。根据蛋白质底物构象的不同，Xa 因子蛋白酶有时也可在其它碱性氨基酸残基处进行切割。在这些已经测序的次级识别位点中，最常见是 Gly-Arg 序列。在 E.coli 中不稳定的蛋白质和被 Xa 因子次级识别位点切割的蛋白质之间似乎存在某种相关性；这似乎表明这些蛋白是处于部分未折叠的状态。Xa 因子蛋白酶不切割位于脯氨酸或精氨酸之前的氨基酸位点。
来源
Xa 因子蛋白酶是从牛血浆纯化得到，并经鲁塞尔（Russell）喹蛇毒液中的活化酶活化处理。
分子量
Xa 因子的主要形式分子量约为 43 kDa，包含两条由二硫键相连的 27 kDa 和 16 kDa 的肽链。SDS-PAGE 电泳时，还原条件下两条链的分子量分别显示为 30 kDa 和 20 kDa。
单位定义
在 6 小时或更短时间内，1 μg 的 Xa 因子能够使 50 μg 测试底物实现 95% 的切割，单位检测条件请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。
浓度
1 mg/ml。
清除
Xa 因子能与苯甲脒-琼脂糖（如：GE Life Science #17-5143-02）发生特异性结合而被清除。
上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,肠激酶-轻链,#P8070L
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶
肠激酶，轻链
#P8070L 2,560 units
#P8070S 480 units
识别位点
概述
肠激酶是一种特异性蛋白酶，其识别序列为Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，切割位点位于赖氨酸残基之后。根据蛋白质底物构象的不同，肠激酶有时也可在其它碱性氨基酸残基处进行切割。肠激酶不切割脯氨酸之前的氨基酸位点。
来源
由克隆有牛肠激酶轻链基因的乳酸克鲁维酵母（K. lactis）菌株纯化而来。
分子量
肠激酶轻链分子量为 26.3 kDa。SDS-PAGE电泳时表观分子量为 31 kDa。
单位定义
1 单位指 25μl 反应体系中，25℃ 条件下，16 小时内，能使 25μg 测试底物（MBP-EKparamyosin-ΔSal）达到 95% 的切割所需要的酶量。单位检测条件请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。
浓度
16,000 U/ml。
清除
肠激酶能通过与交联有胰蛋白酶抑制剂的琼脂糖（如：Sigma T-0637）特异性结合而清除。
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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,Furin 蛋白酶,#P8077L
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶
Furin 蛋白酶
#P8077L 250 units
#P8077S 50 units
识别位点
概述
Furin 蛋白酶是一种类似枯草杆菌蛋白酶的蛋白质前体转化酶。它是分泌途径中的主要加工酶，定位于高尔基体反面的网状结构部位。其底物包括：凝血因子，血清蛋白和生长因子受体（如：胰岛素样生长因子受体）。最短的切割识别位点是：Arg-X-X-Arg▼。然而，该酶倾向作用于 Arg-X-(Lys/Arg)-Arg▼ 位点。在 P6 位置的额外精氨酸似乎能增强切割效率。Furin 活性受 EGTA、α1-抗胰蛋白酶硅酸盐和聚精氨酸化合物抑制。
注意：底物的三维结构以及切割位点周围的氨基酸类型会影响 Furin 蛋白酶的切割特异性。
来源
分离自草地夜蛾（Spodopter afrugiperda，又称秋粘虫）Sf9 细胞，该细胞感染有截短型人 Furin 基因的重组杆状病毒（R. Fuller 惠赠）。
分子量
截短型人Furin 蛋白的分子量为 52.7 kDa，SDS-PAGE 电泳时的表观分子量为 57 kDa。
单位定义
1 单位指 30℃ 条件下，1 分钟内从荧光肽 BOC-RVRR-AMC（Bachem #I-1645）上释放 1 pmol AMC 所需要的酶量，单位检测条件请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。
浓度
2,000 units/ml。
上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,蛋白内切酶 GluC,#P8100S
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶
蛋白内切酶 GluC
#P8100S 50 μg
识别位点
.jpg){kind=small}
特性
通过质谱进行蛋白质组学分析的理想用酶
可用于蛋白和多肽的鉴定
从蛋白酶缺陷型枯草芽孢杆菌中表达，无其它蛋白酶污染
概述
蛋白内切酶 GluC（又称金黄色葡萄菌 V8 蛋白酶）是丝氨酸蛋白酶，能选择性切割谷氨酸羧基端的肽键，同时也能够切割天冬氨酸残基，但其反应速率要比前者慢 100-300 倍。
来源
克隆自金黄色葡萄球菌（Stophylococcus aureus）V8 蛋白酶基因，在枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）中表达。
反应条件
1X GluC 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl，0.5 mM Glu-Glu (pH 8.0 @ 25℃)]，37℃ 温育。
随酶提供的试剂
2X GluC 反应缓冲液。
分子量
29,849 daltons。
重溶
用 50-500 μl 的高纯水溶解。快速自裂解效率随酶浓度不同而异。
注意事项
以液态形式于 -20℃ 可贮存 2 周，但液态形式保存会降低其活性。欲达到最佳效果，请使用新鲜重溶的蛋白酶。
上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,胰蛋白酶-ultra-质谱级,#P8101S
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶
胰蛋白酶-ultra，质谱级
#P8101S 100 μg
识别位点
特性
蛋白酶解产物可用于质谱分析蛋白质组
可用于蛋白和多肽的鉴定
TPCK 处理去除胰凝乳蛋白酶活性
无蛋白酶污染
概述
胰蛋白酶-ultra，质谱级是一种丝氨酸肽链内切酶类，可特异性地切割赖氨酸和精氨酸残基的C 端肽键。经甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮（TPCK）处理的胰蛋白酶-ultra，质谱级灭活了残留的胰凝乳蛋白酶活性。赖氨酸残基的 ε-氨基基团进行乙酰化修饰，以防止酶自裂解。经 TPCK 处理过的质谱级胰蛋白酶-ultra，切割赖氨酸-脯氨酸和精氨酸-脯氨酸之间的肽键速率比切割其它氨基酸残基要慢得多。
来源
来自牛（Bos taurus）胰脏。
反应条件
1X 胰蛋白酶-ultra 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl，20 mM CaCl2（pH 8.0 @ 25 ℃）]，37℃ 温育。
随酶提供的试剂
2X 胰蛋白酶-ultra 反应缓冲液。
分子量
23,675 daltons。
重溶
用 20-200 μl 的高纯水溶解。快速自裂解效率随酶浓度不同而异。
注意事项
以液态形式于 -20℃ 可贮存 1 周，但液态形式保存会降低活性。欲达到最佳效果，请使用新鲜重溶的蛋白酶。
上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,蛋白内切酶 AspN,#P8104S
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶
蛋白内切酶 AspN
#P8104S 50 μg
识别位点
特性
通过质谱进行蛋白质组学分析的理想用酶
无蛋白酶污染
最适用于多肽的鉴定
概述
蛋白内切酶 AspN（flavastacin）是锌金属内切肽酶，能选择性切割天冬氨酸残基的 N-端肽键。
来源
纯化自脑膜脓毒性黄杆菌（Flavobacterium menigosepticum）。
反应条件
1X AspN 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 37℃)，2.5 mM ZnSO4]，37℃ 温育。
随酶提供的试剂
2X AspN 反应缓冲液。
分子量
40,089.9 daltons。
质量保证
蛋白内切酶AspN不含甘油和去污剂，因此避免了这些物质对基质辅助激光解吸/离子飞行时间质谱（MALDI-TOF）、电喷雾电离（ESI）质谱（MS）或液相色谱（LC）可能产生的干扰。
重溶
蛋白内切酶 AspN 应使用 50-500 μl 的高纯水溶解，快速自裂解效率随酶浓度不同而异。
注意事项
以液态形式于 -20℃ 可贮存 2 周，但液态形式保存会降低活性。为达到最佳效果，请使用新鲜重溶的蛋白酶。