NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷外切酶,IdeZ 免疫球蛋白酶,IgG-特异性, #P0770S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 糖苷外切酶

IdeZ 免疫球蛋白酶(IgG-特异性)

#P0770S 4,000 units

特性

  在非变性条件下 30 分钟内能完全片段化抗体或与免疫球蛋白融合表达的蛋白质

概述

IdeZ 免疫球蛋白酶(IgG-特异性)是抗体特异性的重组蛋白酶,克隆自马链球菌兽瘟亚种,能识别所有人、羊、猴、和兔的 IgG 亚类,在铰链区的下方切割单一识别位点,产生同源 F(ab’) 2 和 Fc 段。IdeZ 免疫球蛋白酶切割小鼠 IgG2a 的能力比 IdeS 强。

来源

基因克隆自马链球菌兽瘟亚种(Streptococcus equi subspecies zooepidemicus),在 E. coli 中表达。

反应条件

1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液,37℃ 温育。
热失活:65℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X GlycoBuffer 2 反应缓冲液。

分子量

 35,578 daltons。

单位定义

 1 单位指 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,15 分钟内将 1 μg 人IgG 切割超过 95% 所需要的酶量。

浓度

80,000 units/ml。

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷外切酶,蛋白去糖基化混合液II,#P6044S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 糖苷外切酶

蛋白去糖基化混合液II

#P6044S 20 rxns

特性

 可快速建立反应

 混合糖苷酶有效去除 N-及 O-连接糖链
 可用于变性及非变性反应条件
 去糖基化后留下完整核心结构适用于后续研究

概述

蛋白去糖基化混合液 II 中包含五种糖苷酶、试剂和对照,能切割所有 N-连接糖链及简单 O-连接糖链,也能切割部分复杂 O-连接糖链。试剂盒中的酶能用于 20 次反应,作用于 2 mg 糖蛋白。
小牛胎球蛋白在酶作用下去糖基化,非变性条件使用 10X 去糖基化混合液 1,变性条件使用 10X 去糖基化混合液 2。20 μg 反应产物上样于 10-20% Tris-glycineSDS-PAGE 胶上。泳道 1:彩色预染蛋白标准(11-245kDa)(NEB #P7712);泳道 2:20 μg 未去糖基化的胎球蛋白对照;泳道 3:20 μg 胎球蛋白使用去糖基化混合液 1 在非变性条件下去糖基化;泳道 4:20 μg胎球蛋白使用去糖基化混合液 2 在变性条件下去糖基化;泳道 5:5 μl 蛋白去糖基化酶混合液 II。

随酶提供的试剂

去糖基化混合液 1(10X)
去糖基化混合液 2(10X)

去糖基化酶混合液II

PNGase F(无甘油),重组酶:10,000 units/支
O-糖苷酶:80,000 units/支
α2-3,6,8,9 神经氨酸苷酶 A:400 units/支
β1-4 半乳糖苷酶 S:960 units/支
β-N-乙酰己糖胺酶f:300 units/支

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 肝素裂解酶,细菌肝素酶 I,#P0735L

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 肝素裂解酶

细菌肝素酶 I

#P0735L 600 units

#P0735S 240 units

识别位点

 NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 肝素裂解酶

特性

 降解肝素和硫酸乙酰肝素糖胺聚糖

概述

细菌肝素酶 I 克隆自埃氏拟杆菌(Bacteroides eggerthii),也称为肝素裂解酶 I,可以作用于肝素,也可以作用于硫酸乙酰肝素的高度硫酸化区域。反应产生的寡糖产物包含不饱和糖醛酸,可以在 232 nm 处用紫外吸收光谱检测。

来源

克隆自埃氏拟杆菌(Bacteroides eggerthii),在 E. coli 中表达。

反应条件

在 100 μl 的反应体系中,加入 10 μg 肝素底物、10 μl细菌肝素酶反应缓冲液和水。反应温度为 30℃。
热失活:100℃ 1 分钟。

随酶提供的试剂

10X 细菌肝素酶反应缓冲液。

分子量

42,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶、硫酸酯酶、糖醛酸酶污染,无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 100 μl 反应体系中,30℃ pH 7.0条件下,每分钟从猪粘膜肝素中释放 1.0 μmol 不饱和寡糖所需的酶量。

浓度

12,000 units/ml。

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 肝素裂解酶,细菌肝素酶 II,#P0736L

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 肝素裂解酶

细菌肝素酶 II

#P0736L 200 units

#P0736S 80 units .

识别位点

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 肝素裂解酶

特性

降解肝素和硫酸乙酰肝素糖胺聚糖

概述

细菌肝素酶 II 克隆自埃氏拟杆菌(Bacteroides eggerthii),也称为肝素裂解酶 II ,既可以作用于肝素,也可以作用于硫酸乙酰肝素。反应产生的寡糖产物包含不饱和糖醛酸,可以在 232 nm 处用紫外吸收光谱检测。

来源

克隆自埃氏拟杆菌(Bacteroides eggerthii),在 E. coli 中表达。

反应条件

在 100 μl 的反应体系中,加入 10 μg 肝素底物、10 μl细菌肝素酶反应缓冲液和水。反应温度为 30℃。
热失活:100℃ 1 分钟。

随酶提供的试剂

10X 细菌肝素酶反应缓冲液。

分子量

86,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶、硫酸酯酶、糖醛酸酶污染,无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 100 μl 反应体系中,30℃ pH 7.0条件下,每分钟从猪粘膜肝素中释放 1.0 μmol 不饱和寡糖所需的酶量。单位检测条件请登陆www.neb-china.com,www.neb.com。

浓度

4,000 units/ml。

上海金畔生物科技有限公司官网,NEB代理,订购热线:18301939375

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 肝素裂解酶,细菌肝素酶 III,#P0737

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 肝素裂解酶

细菌肝素酶 III

#P0737L 35 units

#P0737S 14 units

识别位点

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 肝素裂解酶

特性

 降解硫酸乙酰肝素糖胺聚糖

概述

细菌肝素酶 III 克隆自埃氏拟杆菌(Bacteroides eggerthii),也称为肝素裂解酶 III,作用于硫酸乙酰肝素。反应产生的寡糖产物包含不饱和糖醛酸,可以在 232 nm 处用紫外吸收光谱检测。

来源

克隆自埃氏拟杆菌(Bacteroides eggerthii),在 E. coli 中表达。

反应条件

在 100μl 的反应体系中,加入 10μg 硫酸乙酰肝素、10μl 细菌肝素酶反应缓冲液和水。反应温度为 30℃。
热失活:100℃ 1 分钟。

随酶提供的试剂

10X 细菌肝素酶反应缓冲液。

分子量

75,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶、硫酸酯酶、糖醛酸酶污染,无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 100 μl 反应体系中,30℃ pH7.0 条件下,每分钟从硫酸乙酰肝素中释放 1.0 μmol 不饱和寡糖所需的酶量。单位检测条件请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

浓度

700 units/ml。

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示,抗 M13 pIII 单克隆抗体,#E8033S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 噬菌体展示

抗 M13 pIII 单克隆抗体

#E8033S 0.1 ml

概述

抗 M13 pIII 单克隆抗体(鼠 IgG2a 同型物)来源于鼠骨髓瘤细胞和脾细胞融合产生的 A23 杂交瘤。BALB/c 小鼠是用 M13 衣壳蛋白 III C 端一半的肽段(259-406 残基)进行免疫。

注意事项

不建议用此抗体做 ELISA 来鉴定完整噬菌体,因为 M13 噬菌体上的抗原决定簇不易暴露。

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示,Ph.D.-7 噬菌体展示肽库试剂盒,#E8100S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 噬菌体展示

Ph.D.-7 噬菌体展示肽库试剂盒

#E8100S 10 次淘选实验

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Ph.D.试剂盒组成

– 10 次独立淘选实验的足量噬菌体展示库,109 个克隆
– 28 gIII 测序引物(100 pmol)
– 96 gIII 测序引物(100 pmol)
– E. coli 宿主菌 ER2738
– 对照实验靶分子(链霉亲和素)和洗脱剂(生物素)
– 详细的使用手册
 建议测序引物序列(不单独提供)如下:
-28 gIII 测序引物 (22-mer)
5´d(GTATGGGATTTTGCTAAACAAC)3´
-96 glll 测序引物 (20-mer)
5´d(CCCTCATAGTTAGCGTAACG)3´

概述

噬菌体展示是一种体外筛选技术。它可以将一系列多肽或蛋白质文库展示在噬菌体颗粒的外部,而编码这些蛋白的 DNA 则位于病毒颗粒内部。利用展示蛋白与其编码 DNA 之间的联系,我们可以通过一种简单的称为“生物淘选”的体外筛选方法,快速筛选出给定靶分子(抗体、酶、细胞表面受体等)的亲和配体。最简单的淘选方法是(见图 1):将展示不同多肽的噬菌体文库与固定在平板或小珠上的靶分子孵育,先洗去未结合的噬菌体,而后洗脱特异性结合的噬菌体。扩增洗脱下的噬菌体。重复上述结合扩增过程,使与靶分子结合的多肽序列的噬菌体得到富集。经过 3-4轮筛选后,每个克隆通过 DNA 测序或 ELISA 鉴定。
NEB 提供 3 种随机肽库和供自制肽库所需的 M13KE克隆展示载体。这 3 种肽库包括 7 肽库(Ph.D.-7)、12 肽库(Ph.D.-12)和含有二硫键的环 7 肽库(Ph.D.-C7C)。Ph.D.-C7C 随机肽库所展示的多肽两侧各加了一个半胱氨酸。噬菌体组装时经过氧化,形成环化的多肽。所有肽库的容量超过 20 亿个克隆。上述 3 种肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜蛋白 pIII 的 N 端,故每一个病毒粒子可以表达 5 个拷贝。
展示在噬菌体表面的随机肽库已被应用于多种领域,包括绘制抗原表位图谱(图 2)、研究蛋白质与蛋白质相互作用及酶抑制剂,并且还用于发现 GroEL、HIV、半导体表面、小分子荧光团和药物的肽配基。
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示,Ph.D.多肽展示克隆系统,#E8101S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 噬菌体展示

Ph.D.多肽展示克隆系统

 #E8101S 20 μg 克隆载体 16 μg 延伸引物

概述

Ph.D.多肽展示克隆系统是为方便使用者自制肽库而设计的,所展示的多肽与位于细菌噬菌体M13 表面的衣壳蛋白相融合。因此,此系统将展示肽与其编码基因相互关联。通过直接淘选法即可筛选到各种靶标的肽配基。M13KE 展示载体来源于M13,其克隆位点已改造,能使随机展示肽融合于次要包膜蛋白 pIII 的 N 端,因此每个病毒粒子带有 5 个展示肽。本系统使用噬菌体载体,而不是噬菌粒,主要是因为前者无需抗生素筛选和辅助噬菌体重复感染,从而简化了中间的扩增步骤。由于展示肽大于 20-30 个氨基酸会严重影响 pIII 的感染力,因此本载体仅适合短肽的展示。随克隆载体系统还提供一个插入延伸引物和详细的操作说明书。
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示,Ph.D.-12 噬菌体展示肽库试剂盒,#E8110S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 噬菌体展示

Ph.D.-12 噬菌体展示肽库试剂盒

#E8110S 10 次淘选实验

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单独出售的组份

Ph.D.-12 Library
#E8111L         50 次淘选实验         ¥22,219

Ph.D.试剂盒组成

– 10 次独立淘选实验的足量噬菌体展示库,109 个克隆
– 28 gIII 测序引物(100 pmol)
– 96 gIII 测序引物(100 pmol)
– E. coli 宿主菌 ER2738
– 对照实验靶分子(链霉亲和素)和洗脱剂(生物素)
– 详细的使用手册
 建议测序引物序列(不单独提供)如下:
-28 gIII 测序引物 (22-mer)
5´d(GTATGGGATTTTGCTAAACAAC)3´
-96 glll 测序引物 (20-mer)
5´d(CCCTCATAGTTAGCGTAACG)3´

概述

噬菌体展示是一种体外筛选技术。它可以将一系列多肽或蛋白质文库展示在噬菌体颗粒的外部,而编码这些蛋白的 DNA 则位于病毒颗粒内部。利用展示蛋白与其编码 DNA 之间的联系,我们可以通过一种简单的称为“生物淘选”的体外筛选方法,快速筛选出给定靶分子(抗体、酶、细胞表面受体等)的亲和配体。最简单的淘选方法是(见图 1):将展示不同多肽的噬菌体文库与固定在平板或小珠上的靶分子孵育,先洗去未结合的噬菌体,而后洗脱特异性结合的噬菌体。扩增洗脱下的噬菌体。重复上述结合扩增过程,使与靶分子结合的多肽序列的噬菌体得到富集。经过 3-4轮筛选后,每个克隆通过 DNA 测序或 ELISA 鉴定。
NEB 提供 3 种随机肽库和供自制肽库所需的 M13KE克隆展示载体。这 3 种肽库包括 7 肽库(Ph.D.-7)、12 肽库(Ph.D.-12)和含有二硫键的环 7 肽库(Ph.D.-C7C)。Ph.D.-C7C 随机肽库所展示的多肽两侧各加了一个半胱氨酸。噬菌体组装时经过氧化,形成环化的多肽。所有肽库的容量超过 20 亿个克隆。上述 3 种肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜蛋白 pIII 的 N 端,故每一个病毒粒子可以表达 5 个拷贝。
展示在噬菌体表面的随机肽库已被应用于多种领域,包括绘制抗原表位图谱(图 2)、研究蛋白质与蛋白质相互作用及酶抑制剂,并且还用于发现 GroEL、HIV、半导体表面、小分子荧光团和药物的肽配基。
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示,Ph.D.-12 噬菌体展示肽库,#E8111L

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噬菌体展示是一种体外筛选技术。它可以将一系列多肽或蛋白质文库展示在噬菌体颗粒的外部,而编码这些蛋白的 DNA 则位于病毒颗粒内部。利用展示蛋白与其编码 DNA 之间的联系,我们可以通过一种简单的称为“生物淘选”的体外筛选方法,快速筛选出给定靶分子(抗体、酶、细胞表面受体等)的亲和配体。最简单的淘选方法是(见图 1):将展示不同多肽的噬菌体文库与固定在平板或小珠上的靶分子孵育,先洗去未结合的噬菌体,而后洗脱特异性结合的噬菌体。扩增洗脱下的噬菌体。重复上述结合扩增过程,使与靶分子结合的多肽序列的噬菌体得到富集。经过 3-4轮筛选后,每个克隆通过 DNA 测序或 ELISA 鉴定。
NEB 提供 3 种随机肽库和供自制肽库所需的 M13KE克隆展示载体。这 3 种肽库包括 7 肽库(Ph.D.-7)、12 肽库(Ph.D.-12)和含有二硫键的环 7 肽库(Ph.D.-C7C)。Ph.D.-C7C 随机肽库所展示的多肽两侧各加了一个半胱氨酸。噬菌体组装时经过氧化,形成环化的多肽。所有肽库的容量超过 20 亿个克隆。上述 3 种肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜蛋白 pIII 的 N 端,故每一个病毒粒子可以表达 5 个拷贝。
展示在噬菌体表面的随机肽库已被应用于多种领域,包括绘制抗原表位图谱(图 2)、研究蛋白质与蛋白质相互作用及酶抑制剂,并且还用于发现 GroEL、HIV、半导体表面、小分子荧光团和药物的肽配基。
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示
NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 噬菌体展示

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