Grace高压制备色谱配套的制备柱和色谱填料

色谱柱和填料

Grace提供各种预填装的制备柱、行业的柱硬件和多种色谱填料，来提REVELERIS?Prep纯化系统的性能。Grace的硅胶类填料装填于柱硬件中，延长柱使用寿命，确保高柱效。

用于REVELERIS Prep纯化系统的预填装柱推荐:

DAVISIL?710N色谱柱：通用

Alltima? ： 高品质的通用分析色谱柱
?  有大量的应用数据支持
?  适用于毛细管柱分析应用，对于常规的毛细管柱分析的流动相耐受性好
?  对酸性和碱性化合物均有对称性良好的峰形
?  聚合式键和及两次封尾提供高柱寿命
?  从毛细管柱到半制备柱，提供全套规格

  色谱柱在使用前，进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是*条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 
1、样品的前处理： 
   a、使用流动相溶解样品。 
   b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 
   c、使用0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。 
2、流动相的配制： 
      液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点： 
   a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 
   b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。 
   c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。 
   d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，使用对紫外吸收较低的溶剂配制。 
   e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。 
   f、在流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
3、流动相流速的选择： 
   因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求*柱效，使用*流速。对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1ml／min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8ml／min为佳。 
   当选用*流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量)。 
注意： 
   a．由于甲醇廉价，对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。 
   b．对于正相柱推荐使用沸程为30-60℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相，没有提纯的己烷不得使用。用水使用超纯水(电阻率大于18兆欧)，去离子水及双蒸水中含有酚类杂质，有可能影响分析结果。 
   c．含水流动相zui＊在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要隔天。加入*，防止细菌生长。 
   d．流动相要求使用0.45 µm滤膜过滤，除去微粒杂质。 
   e．使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高柱性能。

制备方法印证以及优化

将分析液相色谱得到的制备色谱条件放大到半制备色谱系统，印证制备色谱条件，进一步优化

推荐系统：LC3050半制备液相色谱系统
 

订货信息：
 

备注：该制备色谱系统可以接中压玻璃柱，也可以接高压制备柱，简单方便

半制备色谱系统，，

FUJI 富士色谱填料填料具有很好的机械稳定性。不论是用于分析柱还是制备柱，都能经受多次反复装柱。此外每个生产批号的产品都要经过广泛的质量检验，试验，确保批次之间性能的可靠。
　　Chromatorex硅胶填料的生产达到很高的化学纯度标准。有机物和痕量金属含量被控制在严格的限度之内。分离结果的高度可重现性允许直接放大而不必经过耗时的方法开发。这是对化学纯度，表面积，孔容和孔径严格控制的直接结果。 
FUJI 富士色谱填料特点及优势：  
※ 多种粒径选择有利于柱效的优化。
※ 狭窄的粒径分布保持低柱压。
※ 保留时间的*性和重现性允许从实验室规模放大到工业应用。
※ 批次之间的*性保证性能的重现性。
※ 生产规模巨大，没有放大上限的制约。
有条件根据客户要求选择特定批次产品。
SPS级超纯硅胶系列：广泛用于装填分析柱及高效制备柱。
SMB级高纯硅胶系列：高效分析及制备，中低压制备。
MB球形硅胶系列：正相，flash及吸附色谱理想填料，可直接用于放大。
GS无定形硅胶系列：机械性能稳定，价格低廉。使用于开口住柱，低压柱，甚至单批次生产。

YMC公司生产的填料有两种类型：球形和不规则形，每种类型都有十分丰富的品种。球形填料可用于分析和制备色谱柱，包括：10μm、15μm、20μm、50μm、75μm和150μm，其粒径的质量经过严格的控制。YMC S-50 Gel (粒径为50μm)是zui常用的制备色谱填料，其具有中等程度的粒径和非常优秀的性能价格比。相对于不规则填料，由于其高度的同一性，因此其有更高的柱效，更好的装填重现性和低的压降。不规则填料用于制备色谱柱和开管柱色谱。对于两种类型的填料，粒径越小，可以得到更高的柱效。

有机酸分析柱Prevail Organic Acid为常规有机酸的分析提供了兼顾分辨率、分析速度、灵敏度和操作简单性的方法。只需使用简单的酸性磷酸盐缓冲液和一根Prevail OA 柱，室温下操作，即可在6分钟内分离分析11个短链有机酸化合物（如图）。使用pH 来调节柱选择性，降低流动相的pH 值可以抑制羧酸的电离而提高它们的疏水性，可以用于对峰保留位置的调整，使得方法的开发简单易行。

有机酸分析柱Prevail Organic Acid规格介绍:

生物碱色谱填料聚合物系列层析填料采用世界上先进的聚合物微球制备技术聚合，严格控制比表面积、孔径结构、粒径大小，表面性能，使其具有分辨率高、载量大、刚性强、耐酸碱、耐高温、反压低、使用寿命长及非特异性吸附低等特点，克服了硅胶色谱填料pH使用范围窄、操作温度受限、使用寿命短的缺点。

intecarb生物碱色谱填料产品简介：

intecarb是采用世界上先进的高分子合成技术，合成的新一代填料，其刚性强，粒径大小均一（见下图），反压低，并具有孔结构分布。与传统的只能用于低压的聚合物填料相比具有更高的分辨率和选择性，而且可以克服硅胶填料pH值适用范围窄的限制。从实验室制备到大规模工业化生产，intecarb显示出其*的*性。

intecarb生物碱色谱填料主要技术指标：

● intecarb对甜菊糖苷的分离

intecarb对Stevioside和Rebaudioside A的分离效果图

● 用intecarb制备Stevioside和Rebaudioside A

甜菊糖苷纯化前色HPLC谱图：Stevioside纯度 43%

Rebaudioside A 纯度38%

纯化后的Stevioside纯度~98%  纯化后的Rebaudioside A纯度~98%

检测方法：

流动相：乙腈：水=80：20    

检测波长：210nm

进样量：20ul                

流速：1.0ml/min

● CIP/SIP稳定性

生物碱色谱填料现在的生物制药监管部门对生物制药企业整个生产过程要求有更严格、更有效的清洗方法，来确保zui终产品的高纯度。目前FDA等接受的zui常用的清洗方法是使用NaOH去除来自柱子上的和与纯化系统关联的下游组分的残留物，硅胶反相层析填料的缺点是在碱性条件下化学稳定性差，而intecarb填料NaOH具有*的稳定性，适用于CIP/SIP 的清洗方案。

● 化学稳定性

几乎适用于所有水溶液（包括：1M NaOH；1M HCL），和其他有机溶剂如异丙醇、甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等。

● 物理和热学稳定性

intecarb层析填料可以耐受40bar的压力、120℃的高温，物理性质和热稳定性很好。

再生试剂/洗脱试剂

与水互溶的有机溶剂（甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇等）去除疏水性化合物。

纯溶剂 再生因油和消泡剂而污染的树脂。

碱（0.1－2％NaOH）加有机溶剂洗脱弱酸化合物等。

酸（0.1－2％HCl）加有机溶剂洗脱弱碱化合物等。

稀氧化剂（<0.5％）如过氧化物加强蛋白质去除。

热氮或蒸汽除去挥发性物质。

Carbohydrate ES聚合物层析填料采用世界上先进的聚合物微球制备技术聚合，严格控制比表面积、孔径结构、粒径大小，表面性能，使其具有分辨率高、载量大、刚性强、耐酸碱、耐高温、反压低、使用寿命长及非特异性吸附低等特点，克服了硅胶色谱填料pH使用范围窄、操作温度受限、使用寿命短的缺点。

Carbohydrate ES糖分离聚合物色谱填料产品介绍：

Carbohydrate ES是采用世界上先进的高分子合成技术，合成的新一代填料，其刚性强，粒径大小均一（见下图），反压低，并具有*的孔结构分布。与传统的只能用于低压的聚合物填料相比具有更高的分辨率和选择性，而且可以克服硅胶填料pH值适用范围窄的限制。从实验室制备到大规模工业化生产，Carbohydrate ES显示出其*性。

Carbohydrate ES糖分离聚合物色谱填料技术指标：

Carbohydrate ES对甜菊糖苷的分离

用Carbohydrate ES制备Stevioside和Rebaudioside A

甜菊糖苷纯化前色HPLC谱图：Stevioside纯度 43%

Rebaudioside A 纯度38%

检测方法：

流动相：乙腈：水=80：20    

检测波长：210nm

进样量：20ul                

流速：1.0ml/min

1、CIP/SIP稳定性

现在的生物制药监管部门对生物制药企业整个生产过程要求有更严格、更有效的清洗方法，来确保zui终产品的高纯度。目前FDA等接受的zui常用的清洗方法是使用NaOH去除来自柱子上的和与纯化系统关联的下游组分的残留物，硅胶反相层析填料的缺点是在碱性条件下化学稳定性差，而Carbohydrate ES填料NaOH具有良好的稳定性，适用于CIP/SIP 的清洗方案。

2、化学稳定性

几乎适用于所有水溶液（包括：1M NaOH；1M HCL），和其他有机溶剂如异丙醇、甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等。

3、物理和热学稳定性

Carbohydrate ES聚合物层析填料可以耐受40bar的压力、120℃的高温，物理性质和热稳定性很好。

4、再生试剂/洗脱试剂

• 与水互溶的有机溶剂（甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇等）去除疏水性化合物。

• 纯溶剂 再生因油和消泡剂而污染的树脂。

• 碱（0.1－2％NaOH）加有机溶剂洗脱弱酸化合物等。

• 酸（0.1－2％HCl）加有机溶剂洗脱弱碱化合物等。

• 稀氧化剂（<0.5％）如过氧化物加强蛋白质去除。

• 热氮或蒸汽除去挥发性物质。

Grace中低压制备色谱（带内置蒸发光和紫外双检测器）系统性能特点：

（Reveleris X2 Flash）特别有优势的解决如下问题：

1：没有紫外吸收的化合物（比如，糖类化合物，氨基酸类化合物，芳香烃类化合物，多糖，寡糖，壳聚糖等等没有苯环的化合物）。

2：末端吸收的化合物，比如201nm，210nm等等，纯紫外检测器在这个末端不好做的。

3：溶剂干扰比较严重的化合物分离，我们系统分离化合物是没有溶剂峰的。

4：未知化合物/新化合物的发现。

5：常规化合物的分离纯化。

(Grace可以保证蒸发光检测到的物质和收集到的物质是同一个化合物，可以解决许多没有紫外吸收或者是糖类化合物的分离纯化，该技术目前我们是的一家)。

Grace中低压制备色谱性能特点：

1:无检测盲区的全能电子眼。同时应用了紫外检测器（UV）和蒸发光散射检测器（ELSD）的核心检测技术，不管待测物质有无紫外吸收，都将毫无遗漏地被检测到，提供了清晰的纯化控制过程，有利于提高收集目标物的纯度。

2:色谱组分更符合质量守恒定律。因为可以毫无遗漏地检测到所有组分，更符合总质量守恒定律，可以得到更准确的组分含量计算。

3:图形化显示“峰与管”的对应关系。馏分收集即时追踪，使用图形方式显示“峰与管”的对应关系，使得馏分收集与色谱峰的对应关系一目了然。

4: 纯化柱品质优良分离效率更高。Reveleris™ SRC技术通过整合柱的优势设计扩展了系统的优势，该种柱可以耐受200psi压力，更加科学的装填方法维持了优良分辨率，同时有效地提高了上样量。

5:多处使用了RFID自动辨识技术。纯化柱和馏分收集盘多处具有RFID 自动辨识与信息加载功能，智能化自动复核分离条件的设置，有效避免了仪器误操作，能够简化工作量。

6:内置双泵四通道输液系统。双泵系统允许梯度洗脱，可以组成多种双梯度模式，便于分离方法优化。而四溶剂通道赋予了分离方法开发的快捷与灵活性。

Grace基本配置：四元梯度泵，紫外-可见光检测器，蒸发光检测器（ELSD）,收集器，软件，控制系统，进样系统。

中高压玻璃柱：多种规格的中高压玻璃色谱柱为您提供了较大的灵活性，根据样品性质和进样量。

TX中高压玻璃柱特点：

1,耐压高，可以接在中压制备色谱和高压制备色谱，拓展仪器的使用范围。
2,喇叭口柱头设计，使样品分配更均匀，可加大上样量，提高分离效率。
3,喇叭口柱头可防止高速流动相对柱床的破坏。
4,以内衬玻璃管的不锈钢夹套代替传统的六通阀定量环，有利于高浓度的样品的分离制备，*消除了高浓度样品阻塞阀接口的现象。
5,法兰柱，操作者容易自己拆洗填料，极大的降低分离硬件成本。
6,玻璃透明，可以使操作者直观了解天然提取物、色素等带有颜色样品的分离状况。

中高压玻璃柱特殊规格可以特殊定制。

中高压玻璃柱在生物实验中的应用主要包括高效制备层析，适用于蛋白质、肽和/或核酸的纯化。这些柱子的设计允许在高压下操作，以应对更高的背压上样，同时保持生物相容性和操作简便性，减少样品损失。

与不锈钢不同，可全视图观察柱床，便于观察实验过程。可根据流动相条件进行定制配置，满足层析操作者的确切需求。坚固的结构，适合严苛的实验室使用条件。