Dinaciclib (SCH727965)是一种新型有效的CDK抑制剂，作用于CDK2，CDK5，CDK1和CDK9，无细胞试验中IC50分别为1 nM，1 nM，3 nM和4 nM。它也会阻断胸甘(dThd) DNA整合。

靶点

体外研究

Dinaciclib抑制CDK1和CDK9 效果差不多，但是抑制CDK2和CDK5效果则分别强12和14倍。Dinaciclib作用于A2780细胞，有效抑制的DNA复制，抑制胸甘(dThd)DNA摄入,IC50为4 nM。Dinaciclib 浓度大于6.25 nM时，强抑制Rb在Ser 807/811位点磷酸化。Rb磷酸化的完全抑制与凋亡发生相关，通过用浓度大于6.25 nM 的Dinaciclib处理的细胞中p85 PARP裂解产物的出现来表示。 Dinaciclib有效作用于广谱人肿瘤细胞系。在羟基脲处理期间加入Dinaciclib,也抑制γ-H2AX累积,这种作用存在剂量依赖性。Dinaciclib 抑制恶性黑色素瘤细胞增殖,使恶性黑色素瘤细胞发生大规模凋亡。Dinaciclib诱导一些骨肉瘤 细胞系凋亡，包括抗Doxorubicin和Dasatinib的细胞。Dinaciclib 降低RNAP II 在 serine 2位点磷酸化，也降低CDK抑制剂p27Kip1在threonine 187位点磷酸化。加入12 nM 到40 nM Dinaciclib处理4小时或16小时，最易使磷酸化作用降低。Dinaciclib也降低Rb在serine 807/811位点磷酸化。Dinaciclib诱导mock-和p53-耗尽的U2OS细胞凋亡，凋亡程度相似。

体内研究

Dinaciclib 每天按8, 16, 32,和48 mg/kg 剂量腹腔注射处理 ，持续10天，导致肿瘤受抑制分别为70%, 70%, 89%,和 96%。Dinaciclib MED(最低有效剂量)约为小于8 mg/kg。Dinaciclib耐药性良好, 且最高剂量处理组中体重损失最高为5%。Dinaciclib 在体内具有抗癌活性，存在剂量依赖性，按低于MTD(最高耐受剂量)的剂量水平处理，几乎完全抑制肿瘤生长。Dinaciclib作用于小鼠，具有短暂的血浆半衰期。

BMS-265246

MB4023

BS-181 HCl

MB4024

Palbociclib (PD0332991) Isethionate

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.5221 mL

12.6107 mL

25.2213 mL

5 mM

0.5044 mL

2.5221 mL

5.0443 mL

10 mM

0.2522 mL

1.2611 mL

2.5221 mL

50 mM

0.0504 mL

0.2522 mL

0.5044 mL

Cyclin/CDK激酶实验:
设计从Sf9细胞中纯化的重组cyclin/CDK 全酶，产生表达特定cyclin 或CDK的杆状病毒。 在含 50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 10 mM MgCl2, 1 mM DTT,和 0.1 mM原钒酸钠的反应buffer中，Cyclin/CDK 复合体稀释成终浓度为 50 μg/mL。每种激酶反应中, 1 μg酶和 20 μL 2-μM 底物溶液 (组蛋白 H1衍生的一种生物素化的肽段) 混合，然后与10 μL 稀释的Dinaciclib结合。加入 50 μL 2 μM ATP和 0.1 μCi 33P-ATP反应开始。激酶反应在室温下进行1小时，然后加入 0.1% Triton X-100, 1 mM ATP, 5 mM EDTA, 和5 mg/mL 链霉亲和素包被的SPA 磁珠而终止反应。使用96-孔GF/B过滤板和Filtermate广谱收集器 收集SPA 磁珠。用 2 M NaCl 冲洗磁珠两遍，然后用含磷酸的2 M NaCl 再冲洗两遍。使用TopCount 96孔液体闪烁计数器测定信号。

细胞实验

• Cell lines: A2780细胞
• Concentrations: 0 μM-5 μM
• Incubation Time: 24小时
• Method: A2780 细胞培养在含10%FBS的DMEM培养基上，每周移动两次，通过使用胰蛋白酶-EDTA分离单细胞层。在96孔Cytostar-T板上每孔加入 100 μL A2780细胞 (5 ×103个)，然后在37oC下温育16到24小时。Dinaciclib 在含2% 14C标记 dThd的完全培养基上连续稀释。培养基从 Cytostar T板上转移，按一式四份加入200 μL 多种Dinaciclib 稀释液，然后细胞在37oC下温育24小时。使用闪烁亲近法测定，在TopCoun上测量累积的放射性标记物渗透率。

动物实验

• Animal Models: 携带A2780肿瘤的裸鼠
• Formulation: 20%羟丙基-β-环糊精
• Dosages: 8 mg/kg, 16 mg/kg, 32 mg/kg,和 48 mg/kg
• Administration: 腹腔注射

Dipyridamole是一种磷酸二酯酶抑制剂，通过红细胞和血管内皮细胞，抑制腺苷的摄取和代谢。

靶点

PDE

双嘧达莫-D20 (主要的)

MB1801-S

双嘧达莫（标准品）

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9816 mL

9.9082 mL

19.8165 mL

5 mM

0.3963 mL

1.9816 mL

3.9633 mL

10 mM

0.1982 mL

0.9908 mL

1.9816 mL

50 mM

0.0396 mL

0.1982 mL

0.3963 mL

175.14

化学式

C6H9NO5

CAS号

89464-63-1

稳定性

3 years -20°C powder

2 years -80°C in solvent

35 mg/mL (199.84 mM)

Water

35 mg/mL (199.84 mM)

Ethanol

35 mg/mL (199.84 mM)

DMOG 是α-酮戊二酸辅助因子的拮抗剂和HIF prolylhydroxylase的抑制剂。

靶点

体外研究

DMOG在微粒体系统中仅有很低的活性，但在完整细胞中可强烈抑制羟基脯胺酸合成。在HPASMC中，DMOG通过抑制脯氨酰羟化酶降低FGF-2诱导的组织和cyclin A表达。

体内研究

在小鼠局部缺血的骨骼肌中，DMOG抑制內源性HIF失活，诱导血管新生。在高血脂症大鼠体内，通过DMOG上调的缺氧诱导因子1a能够增强缺血后处理的心脏保护作用。

MB2865

N-Oleoyl Dopamine(OLDA)

MB5924

6-OHDA;6-羟基多巴胺氢溴酸盐

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

5.2731 mL

26.3657 mL

52.7315 mL

5 mM

1.0546 mL

5.2731 mL

10.5463 mL

10 mM

0.5273 mL

2.6366 mL

5.2731 mL

50 mM

0.1055 mL

0.5273 mL

1.0546 mL

Dovitinib (TKI258, CHIR258) 是多靶点的RTK抑制剂,最有效作用于III型(FLT3/c-Kit)，IC50为1 nM/2 nM,也有效作用于IV类(FGFR1/3)和V类(VEGFR1-4) RTKs，IC50为8-13 nM, 对InsR, EGFR, c-Met, EphA2, Tie2, IGF-1R 和 HER2作用效果稍弱。

靶点

FLT3
(Cell-free assay)

c-Kit 
(Cell-free assay)

FGFR1
(Cell-free assay)

VEGFR3/FLT4
(Cell-free assay)

FGFR3 
(Cell-free assay)

IC50

1 nM

2 nM

8 nM

8 nM

9 nM

体外研究

Dovitinib有效抑制FGFR1/3和VEFFR1-2，IC50为8-13 nM。Dovitinib对InsR, EGFR, c-Met, EphrinA2, Tie2, IGFR1,和HER2抑制效果不大。Dovitinib作用于FGF刺激的野生型B9细胞和F384L突变型B9细胞的生长显示出强细胞毒性，IC50为25 nM。然而，Dovitinib作用于MINV突变型B9细胞显示出低细胞毒性。Dovitinib抑制下游ERK1/2的磷酸化作用。Dovitinib作用于MV4;11 (FLT-3 ITD突变型)时比作用于RS4;11 (FLT-3野生型)显示出更高的抗恶性细胞增生的能力。另一方面，Dovitinib也选择性地抑制FGFR1癌基因配体2-FGFR-阳性的KG1和KG1A细胞系，这些细胞系有FGFR1癌基因配体2-FGFR１聚合基因。另外，Dovitinib抑制8p11骨髓增殖综合征(EMS)病人的原代细胞生长

体内研究

在KMS-11移植鼠模型中，按鼠体重，每千克处理60 mg Dovitinib，导致FGFR3的衰退，结果肿瘤生长抑制率达到94%。在SCID-NOD 鼠中，Dovitinib作用于MV4;11肿瘤时显示出强的抗癌活性。Dovitinib也有效抑制能激活FGFR3的KMS-11肿瘤

特征

Dovitinib是MMRC的首要候选药MMRC, 促进多发性骨髓瘤药物研究；MMRC是汇合领先学术机构的非盈利机构。

Pacritinib,SB1518

MB3910

Quizartinib (AC220)

MB5456

SB1317,TG02

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.5482 mL

12.7411 mL

25.4823 mL

5 mM

0.5096 mL

2.5482 mL

5.0965 mL

10 mM

0.2548 mL

1.2741 mL

2.5482 mL

50 mM

0.0510 mL

0.2548 mL

0.5096 mL

体外激酶实验:
在体外研究时，Dovitinib溶解在DMSO中，浓度达到20mM,在实验使用前用培养基稀释。FGFR3, FGFR1, PDGFR-β, 和VEGFR1-3的激酶域在含有如下物质的混合物中测定。混合物包含50 mM HEPES (pH 7.0), 2 mM MgCl2, 10 mM MnCl2，1 mM NaF, 1 mM DTT (二硫苏糖醇), 1 mg/mL BSA (牛血清清蛋白), 0.25 µM 生物肽段基质(GGGGQDGKDYIVLPI), 1到30 µM ATP (加量取决于酶的Km值)。测定c-KIT 和FLT3的反应，调节PH到7.5，先加入0.25 到1 µM生物肽段基质(GGLFDDPSYVNVQNL)，然后加入0.2到 8 µM ATP。反应在室温下温育1到4小时，磷酸化的肽段移到含有封闭缓冲液(含25 mM EDTA和50 mM HEPES, pH 为7.5)，且包被链霉亲和素的微量滴定板上。使用回归曲线计算IC50值。

细胞实验

• Cell lines: B9细胞及多发性骨髓瘤细胞(Y373C, G384D, K650E，和J807C)
• Concentrations: 400 nM 左右
• Incubation Time: 72小时
• Method: MTT实验测细胞活力，B9细胞及多发性骨髓瘤细胞按5×103或20×103密度接种在96孔板上。细胞加入30 ng/mL aFGF和100 µg/mL肝素或者1% IL-6 ,及Dovitinib 温育72小时，然后测定细胞活力。

动物实验

• Animal Models: 右侧腹皮下注射KMS-11细胞的雌性BNX 鼠
• Formulation: 5mM柠檬酸盐 buffer
• Dosages: 10, 30,或60 mg/kg
• Administration: 饲喂处理

Edoxaban在临床开发研究中作为口服Xa因子（FXa的）抑制剂，让病人中风时预防心房颤动，针对一些老年人经常服用阿司匹林(ASA)或非甾体类抗炎药物以预防并发症。

靶点

体外研究

Edoxaban PK不受低剂量ASA或萘普生影响，但是高剂量ASA约30%，可增加全身性edoxaban暴露。通过口服ASA或萘普生，edoxaban对凝血酶原时间，活化部分凝血活酶时间，国际标准化比值，抗FXa和固有的FXa活性不会被影响，通过edoxaban，高剂量ASA、低剂量ASA或萘普生抑制血小板聚集没有受到影响。

体内研究

在大鼠和猴子体内，Edoxaban口服给药产生有效的抗Xa活性和高血浆药物浓度。在体内实验中，Edoxaban剂量依赖性抑制大鼠和兔子血栓症模型中的血栓形成。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.3545 mL

6.7726 mL

13.5452 mL

5 mM

0.2709 mL

1.3545 mL

2.7090 mL

10 mM

0.1355 mL

0.6773 mL

1.3545 mL

50 mM

0.0271 mL

0.1355 mL

0.2709 mL

• Animal Models: 大鼠和兔子静脉停滞血栓模型
• Formulation: 0.5% 甲基纤维素
• Dosages: 0.3–3 毫克/千克 (兔子)； 0.5–12.5 毫克/千克(大鼠)
• Administration: 口服

EAI045是一种靶向特定耐药性的EGFR突变体的变构抑制剂。对野生型受体无作用。

靶点

体外研究

EAI045有效抑制H1975细胞中EGFR(Y1173)的磷酸化（EC50=2 nM），但在具有野生EGFR的HaCaT细胞（角质形成细胞系）中无此效果。尽管EAI045对EGFR的突变体有抑制作用，但在H1975和H3255细胞中，尽管浓度达到了10 μM，EAI也没有抗增殖作用。EAI045 能够抑制EGFR（L858R和T790M）突变体，IC50为3 nM。然而，它不能够完全阻止具有EGFR（L858R/T790M）突变体的H1975细胞中EGFR的自身磷酸化。二聚作用有缺陷的/独立的突变体对EAI045更敏感。因为EGFR的激酶激活需要形成二聚体，EAI045可能对EGFR异聚体的某一个亚基具有抑制活性。

体内研究

在小鼠中进行的药代动力学研究表明EAI045的最大血浆浓度为0.57 μM，其半衰期为2.15小时。在给药浓度为20 mg/kg的情况下，其生物利用率为26%。当EAI045与另一阻止EGFR二聚的化合物cetuximab结合使用时，在具有EGFR（L858R/T790M）突变体驱动下的肺癌小鼠模型中，EAI045能显著的减少肿瘤生长。单独EAI045给药的小鼠则没有治疗效果。EAI045与cetuximab结合使用还能在具有L858R/T790M/C797S突变的小鼠中诱导肿瘤体积缩小。说明EAI045和cetuximab具有协同作用。

Foretinib (GSK1363089)

MB3943

Golvatinib (E7050)

MB3945

Ki8751

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.6082 mL

13.0412 mL

26.0824 mL

5 mM

0.5216 mL

2.6082 mL

5.2165 mL

10 mM

0.2608 mL

1.3041 mL

2.6082 mL

50 mM

0.0522 mL

0.2608 mL

0.5216 mL

• Cell lines: H1975, H3255和HaCaT细胞
• Concentrations: 0-100 μM
• Incubation Time: 3天
• Method: 将H1975, H3255和HaCaT细胞以每空500个细胞的密度铺于384孔，加入含10% FBS的RPMI（青霉素/链霉素）培养基。将50 nl连续稀释的化合物加入到细胞培养基中，3天后，测定其细胞活力。

动物实验：

• Animal Models: 携有EGFR(TL) (L858R/T790M点突变)和EGFR(TD) (exon19del/T790M点突变)的小鼠
• Formulation: 10% NMP (10% 1-methyl-2-pyrrolidinone:90% PEG-300)
• Dosages: 60 mg/kg
• Administration: 口服