Alvespimycin 是一种有效的 Hsp90 抑制剂，结合到 Hsp90，EC50 为 62 ± 29 nM。

靶点

体外研究

Alvespimycin是Hsp90的有效抑制剂，与Hsp90结合，EC50为62 nM。 Alvespimycin（17-DMAG）抑制过表达Hsp90客户蛋白Her2的人癌细胞系SKBR3和SKOV3的生长，并导致Her2的下调以及与Hsp90抑制一致的Hsp70的诱导，用于Her2降解，EC50为SKBR3和SKOV3细胞分别为8±4 nM和46±24 nM;对于Hsp70诱导，分别在SKBR3和SKOV3细胞中EC50为4±2nM和14±7nM。与载体对照相比，Alvespimycin剂量依赖性细胞凋亡（在24小时和48小时时间点平均P <0.001），浓度为50nM至500nM，代表药理学可达到的剂量。与许多其他药物相似，Alvespimycin也表现出慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞的时间依赖性细胞凋亡（P <0.001，平均所有剂量），并且暴露24至48小时。此外，Alvespimycin在治疗24和48小时后比17-AAG更有效。

体内研究

在开始静脉注射前，肿瘤生长两个月，每四天一次，一个月内用0、50、100和200 mg/kg的二丙氨酰放射性醇或0、5、10和20 mg/kg的阿尔维斯平霉素。尽管样本不均一，但经hsp90抑制剂治疗的动物的肿瘤体积明显低于对照药物治疗的动物。HSP90抑制剂已被证明在胃肠道癌动物模型中引起肝毒性。尽管如此，在100 mg/kg时，使用双甲酰氨嘧啶的肿瘤大小减小具有统计学意义，而在10或20 mg/kg时，使用阿尔维斯霉素的肿瘤大小显著减小。

MB4695

NVP-BEP800

MB5161

PU-H71

MB5150

STA-9090;STA9090

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.6214 mL

8.1070 mL

16.2140 mL

5 mM

0.3243 mL

1.6214 mL

3.2428 mL

10 mM

0.1621 mL

0.8107 mL

1.6214 mL

50 mM

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–

• 进行MTT测定以确定细胞毒性。 将来自CLL患者的总共1×106个CD19选择的B细胞在Alvespimycin，17-AAG或载体中孵育24或48小时。 然后加入MTT试剂，并在分光光度测量之前将板再温育24小时。 通过用膜联蛋白V-荧光素异硫氰酸酯和碘化丙啶（PI）染色来测定细胞凋亡。 暴露于药物后，用磷酸盐缓冲盐水洗涤细胞，并在1倍结合缓冲液中染色。 通过流式细胞术评估细胞死亡。 使用System II软件包分析数据。 每个样品计数总共10000个细胞。 通过用亲脂性阳离子染料JC-1染色和通过流式细胞术分析来评估线粒体膜电位变化。

动物实验

• 老鼠
• 使用年轻雄性CB-17 / IcrHsd-Prkdc-SCID小鼠。通过在胶原溶液中每个移植物混合1×105BPH1细胞和2.5×105CAF制备重组异种移植物，使其凝胶化，用培养基覆盖并培养过夜。允许肿瘤形成超过8周，然后通过腹膜内注射化合物，用三种不同剂量的二棕榈酰 – 根赤壳素（50,100和200mg / kg）和Alvespimycin（5,10和20mg / kg）治疗4周。每四天用芝麻油。总共12周后，处死小鼠，切除肾脏，将移植物切成两半并拍照，然后进行组织学处理。测量移植物尺寸并使用该公式计算得到的肿瘤体积;体积=宽度×长度×深度×π/ 6。该公式代表了评估肿瘤体积的保守方法，因为它与较小的非侵入性肿瘤相比，低估了大量侵袭性肿瘤的体积。将切除的移植物固定在10％福尔马林中，包埋在石蜡中并加工用于免疫组织化学。