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备注：本公司销售的所有产品仅用于生化科研试验

产品名称 :

 一步法RT-PCR反转试剂盒

品牌 :

 BIOMIGA

货号 :

 RT0213-01

规格 :

 20次/50次/100次

详细信息 :

 

产品简介

 

一步法RT-PCR试剂盒是为从总RNA或mRNA中特异性的反转和扩增目的RNA而设计的。该系统在一种优化反应体系中共用MMLV反转录酶和热启动Taq DNA聚合酶的预混液，能够检测长达4.0 kb的RNA目的片段。总RNA的用量可从0.01 pg到2 μg之间，该试剂盒为50 μl的反应体系。

 

试剂盒组分

 

产 品	RT0213-00	RT0213-01	RT0213-02	RT0213-03
Reactions	5	20	50	100
Enzyme mix: MMLV RT/ Hot start Taq Mix	5 μL	20 μL	50 μL	100 μL
2× Reaction mix （optimized bμffer contains dNTP and Mg2+）	125 μL	500 μL	1.25 mL	2×1.25 mL
5 mM Magnesiμm Sμlfate	125 μL	500 μL	1.0 mL	2×1.0 mL
dd H2O	150 μL	600 μL	1.5 mL	2×1.5 mL

 

保存条件

 

该试剂盒-20°C保存，在此条件下可保存二年。

 

产品特点

 

方便的一管式设置

*的RT-PCR缓冲液及高效性

高度敏感性、特异性及重复性

 

推荐RT-PCR反应体系

 

建议用如下组成配制RT-PCR反应起始液：

组分	50 μl 体系	终浓度
2× Reaction mix	25 μL	1×
Enzyme mix	1.0 μL
Forward Primer （10 μM）	1.0 μL	200 nM
Reverse Primer （10 μM）	1.0 μL	200 nM
RNA template	× μL	Variable （0.01pg – 2μg）
Final Volμme （μL）	50 μL	用dd H2O补足50 μL体系

*如有必要，镁盐浓度可进一步优化。

1．将反应溶液在冰上解冻。

2．按下列热循环程序进行反应，以便cDNA合成之后立刻进行PCR扩增。

     cDNA合成: 1 cycle: 40–50°C for 10 min

      变性: 1 cycle: 94°C for 2 min

      PCR 扩增: 40 cycles:

                     94°C for 15 s

                     55-65°C for 30 s

                     68°C for 1 min/kb

3．用凝胶电泳检测RT-PCR扩增产物。