支原体检测试剂盒
MycoTestTM Kit说明书
（支原体检测试剂盒）
产品简介：
MycoTestTM Kit是利用降落聚合酶链式反应技术（TD-PCR）对支原体16S rRNA 基因高度保守区域特异性片段进行扩增检测。该方法灵敏度高，特异性强，可用于各种生物材料（如细胞培养基、实验动物分泌物、动物血清等）支原体感染的检测。
MycoTestTM Kit中所含的Mix 能特异性扩增多种支原体16S rRNA 基因片段，可以达到一次性检测多种支原体的目的。本试剂盒根据欧洲药典中对于生物制药生产过程中（参考资料：European pharmacopoeia 7.0, 2.6.7.），对于支原体的检测要求定制而成，与传统的选择性培养基培养检测方法相比较，本方法更为快速，具有高灵敏性，高特异性和高性价比。不会由于培养法检测时大量培养支原体可能带来的次级污染的问题。
产品规格：
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组分/货号 |
NA801（5 rxns） |
NA802（20 rxns） |
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Mix |
160 μL |
600 μL |
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Positive |
12 μL |
22 μL |
常见支原体种类：
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支原体种类 |
中文名称 |
PCR条带大小 |
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M. orale |
口腔支原体 |
462 bp |
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M. hyorhinis |
猪鼻支原体 |
464 bp |
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A. laidlawii |
莱氏无胆甾原体 |
438 bp |
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M. salivarium |
唾液支原体 |
466 bp |
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M. arginini |
精氨酸支原体 |
465 bp |
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M. fermentans |
发酵支原体 |
461 bp |
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M. hominis |
人型支原体 |
463 bp |
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M.pneumoniae |
肺炎支原体 |
470 bp |
运输方式：
4℃
储存条件及有效期：
4℃，1个月；长期存储-20℃，12个月；
操作步骤：
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待检样品，直接取2 μL上清液作为PCR模板；
（注：悬浮细胞需要1000 rpm 离心4 min）
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反应体系配置：
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无菌水 |
19 μL |
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Mix |
29 μL |
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样品/对照 |
2 μL |
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PCR反应程序：
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94 ℃ |
90 s |
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94 ℃ 70-61 ℃ 72 ℃ |
30 s 30 s 45 s |
20 cycles（每2个循环降1℃，或者每1个循环降0.5℃。） |
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94 ℃ 60 ℃ 72 ℃ |
30 s 30 s 45 s |
20个循环 |
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72 ℃ |
4 min |
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4. 取5ul PCR扩增产物，使用1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR结果。
结果分析：