产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 糖苷内切酶
PNGase A
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规 格
价 格(元)
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#P0707L
750 单位
13,299.00
有
无
无
无
无
#P0707S
150 单位
3,319.00
有
无
无
无
无
识别位点
PNGase A 可以从糖蛋白/糖肽链上水解 N-糖链，无论是否有木糖还是岩藻糖的存在。[x = H 或甘露糖或 N-乙酰葡糖胺]
特性
从糖蛋白上切除 N-连接糖链
描述
PNGase A 是一种重组酰胺酶，切割糖蛋白和糖肽链上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和短复合寡糖，常见于植物和昆虫细胞中的 N-糖部分。
切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。
PNGase A 与PNGase F 的不同点在于，无论 N-连接糖链的核心结构上是否连接有 α(1,3)-岩藻糖，前者都能切割。
来源
PNGase A 的基因克隆自稻（Oryza sativa，rice）并在毕赤酵母（Pichia Pastoris）中表达。
反应条件
将 1 μg 重组抗生物素蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40 mM DTT）中 100℃ 煮沸10 分钟使其变性，再加入 NP-40、1X GlycoBuffer 3缓冲液和 2 倍稀释的 PNGase A，37℃ 反应 1 小时。
热失活：65℃ 10 分钟。
随酶提供的试剂
10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 3 反应缓冲液
10% NP-40
分子量
63,800 daltons。
质量保证
无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶F1、F2 和 F3 活性，无蛋白水解活性。
单位定义
1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃条件下，1 小时从 1 μg 变性的重组抗生素蛋白中（在玉米表达），除去超过 95% 的碳水化合物所需要的酶量。
浓度
5,000 units/ml。
注意事项
PNGase A 在糖蛋白和糖肽链中都有活性。
PNGase A 不能切割长的 N-连接糖链如：胎球蛋白、纤维蛋白原、IgG、乳铁蛋白和转铁蛋白。
PNGase A 能够切割高甘露糖型的 N-连接糖，甘露糖数量从 3 个到 9 个。
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