GSK1059615是双重PI3Kα/β/δ/γ (可逆的)和mTOR抑制剂，IC50分别为0.4 nM/0.6 nM/2 nM/5 nM 和 12 nM。

靶点

PI3Kα

PI3Kβ

PI3Kγ

PI3Kδ

IC50

0.4 nM

0.6 nM

5 nM

2 nM

体外研究

GSK1059615也抑制mTOR，IC50为12 nM。GSK1059615抑制PI3K通路，诱导细胞停滞在G1期，可观察到凋亡。GSK1059615有效作用于胸腺癌细胞。GSK1059615作用于T47D和BT474癌细胞，是PI3K抑制剂，降低细胞内AKT在Ser473位点磷酸化，IC50为40 nM。

体内研究

GSK1059615 作用于携带移植瘤的小鼠，完全抑制肿瘤生长, 且血浆胰岛素水平提高。GSK1059615按25 mg/kg剂量,口服给药BT474 或HCC1954胸腺癌，每天两次，导致瘀血或肿瘤衰退。

特征

GSK1059615是GlaxoSmithKline的第一个PI3K临床化合物。

CUDC-907

MB5316

CZC24832

MB3215

Duvelisib (IPI-145)

MB3886

GDC-0032

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.9998 mL

14.9988 mL

29.9976 mL

5 mM

0.6000 mL

2.9998 mL

5.9995 mL

10 mM

–

–

–

50 mM

–

–

–

激酶实验:
GSK1059615溶于0.1 μL 100% DMSO，然后加384孔板上,但是第6列和第18列不加。GSK1059615从第1列到12列以及从第13列到24列连续稀释，第6列和第18列的孔中仍然只含DMSO，获得11种不同浓度。实验 buffer含MOPS (pH 6.5), CHAPS, 和DTT。PI3Kα和PIP2(L-alpha-D-肌肉-磷脂酰环己六醇4,5-二磷酸[PI(4,5)P2]3-O-二氧磷酸基相连的,D(+)-sn-1,2-di-O-辛酰甘油基)混合，然后在板中和GSK1059615温育30分钟，然后加入P33-ATP 和MgCl2开始反应。没有酶的孔（第18列）作为低对照组。加入溶于 PBS/EDTA/CHAPS 的PEI-PS铅头珠而终止反应，然后板再温育至少1小时（一般情况是温育过夜），然后进行离心。 使用Viewlux检测器测定信号，然后 输入曲线拟合软件用于绘制浓度反应曲线。 根据高对照组 (C1, 0.1 μL DMSO，第6列， A-P行)和低对照组 (C2, 第18列,第A-P行),使用 100*(1-(U1-C2)/(C1-C2))公式计算抑制活性百分数。

细胞实验：

• Cell lines: BT474, HCC1954和T-47D细胞
• Concentrations: 1 μM 左右
• Incubation Time: 72小时
• Method: 培养BT474, HCC1954 和T-47D (人类胸腺细胞)。细胞分到T75 烧瓶中，进行2到3天，然后开始实验，到收集的时候获得70-80% 融合细胞。使用0.25%胰蛋白酶-EDTA获得细胞。使用台酚蓝排除性染色在细胞悬浮液中测定细胞数。细胞接种在384孔黑色平底板上，板上含48 μL 培养基，每孔接种103个细胞，过夜处理。第二天，加入GSK1059615。实验第一天，用CellTiter-Glo处理板，然后测量读数。连续稀释两次的GSK1059615储备在384孔板上。4 μL 稀释液加到105 μL 培养基中, 混合后, 细胞板的每孔中加入2 μL 这种稀释液。DMSO 终浓度为0.15%。细胞温育72小时。然后计数。然后在实验板上加同等体积的CellTiter-Glo试剂。震荡板2分钟，在室温下温育30分钟，然后在Analyst GT 计数板上读取化学发光信号。使用 XLfit 软件绘制剂量反应曲线，测定IC50值。

动物实验：

• Animal Models: 携带BT474 或HCC1954的小鼠
• Formulation: 在溶于水的10% 丙二醇中配制
• Dosages: 25 mg/kg
• Administration: 注射处理